靶向下调Cep55表达水平对肝癌细胞增殖能力的影响
2016-04-17孟凡迪张靖垚付军科吴齐飞
张 勇,孟凡迪,张靖垚,付军科,刘 昌,吴齐飞
(西安交通大学第一附属医院:1. 胸外科;2. 肝胆外科,陕西西安 710061)
靶向下调Cep55表达水平对肝癌细胞增殖能力的影响
张 勇1,孟凡迪2,张靖垚2,付军科1,刘 昌2,吴齐飞1
(西安交通大学第一附属医院:1. 胸外科;2. 肝胆外科,陕西西安 710061)
目的 通过siRNA干扰技术下调中心体相关蛋白Cep55的表达水平,并检测对肝癌HepG2和Hep3B细胞增殖能力的影响,为原发性肝癌的基因靶向治疗提供理论依据。方法 应用Cep55特异性siRNA转染肝癌HepG2和Hep3B细胞,采用Real-time PCR和Western blot方法分别从mRNA和蛋白质水平检测Cep55 siRNA对Cep55基因的干扰效果,MTT法检测下调Cep55表达水平时细胞增殖能力的变化,流式细胞仪检测细胞周期分布变化。结果 与阴性对照组比较,干扰siRNA组Cep55的mRNA及蛋白表达水平均出现明显降低(P<0.05);MTT检测结果显示下调Cep55表达水平能够显著抑制肝癌细胞增殖(P<0.05);流式细胞仪检测显示下调Cep55表达水平能够增加G1期细胞的比例,同时降低G2-M期细胞的比例,出现明显的G2期阻滞。结论 下调Cep55表达水平能够显著抑制肝癌细胞的增殖能力,并出现G2期阻滞,提示Cep55可能成为原发性肝癌的有效治疗靶点。
中心体相关蛋白Cep55;原发性肝癌;细胞增殖;细胞周期;siRNA
原发性肝癌是全球最主要的恶性肿瘤之一,其病程进展迅速,并具有很高的复发及转移率;近年来成为我国肿瘤相关死亡率的第二位,仅次于肺癌,已成为影响人类身体健康并造成经济重大危害的世界卫生问题。原发性肝癌主要治疗方式目前仍是手术切除,但因其起病隐匿,早期发现困难,致使确诊时病程往往进展到局部晚期或有远处转移,单纯手术切除困难,且术后肝癌的复发率较高。因此,探索关于原发性肝癌有效的早期检测与治疗手段,对提高肝癌患者的术后生存质量有重要实际意义。
中心体相关蛋白(centrosomal protein 55 ku, Cep55)是新近发现的典型卷曲螺旋蛋白家族成员之一,其主要功能是锚定微管聚合相关蛋白,参与纺锤体形成,进而调控细胞增殖。……
