杨乾栩， 和智君， 杨 蕾， 张天栋， 曽晓鹰， 王保兴， 杨 清*

（1.云南中烟工业有限责任公司 技术中心，云南 昆明 650231；2.昆明理工大学 环境科学与工程学院，云南 昆明650500）

1.2.3 缓冲溶液配置 精确称量柠檬酸19.21 g，柠檬酸钠29.41 g，分别加入1 L纯净水，即配置为0.1 mol/L缓冲溶液。量取0.7、3.2、4.6、5.7、6.6、8.0、9.3和10.0 mL的柠檬酸，并分别加入9.3、6.8、5.4、4.3、3.4、2.0、0.7和0.0 mL的柠檬酸钠中，即配置得pH分别为6.6、5.4、4.8、4.4、4.0、3.4、3.0、2.0的柠檬酸-柠檬酸纳缓冲溶液。

1.2.4 单一酶作用参数考察 称量果胶酶、酸性蛋白酶、纤维素酶各960 mg，分别溶解于60 mL缓冲溶液中为母液，其中果胶酶和酸性蛋白酶分别溶于pH3.4的缓冲溶液，纤维素酶溶于pH 4.8的缓冲溶液；将各母液依次二倍稀释为16，8，4，2，0.4 mg/ mL。取30 mL酶液，喷洒于120 g烟梗上，此时每个烟梗中酶质量分数为 0.4%，0.2%，0.1%，0.05%，0.01%；将处理后的烟梗装密封袋，于48℃下，保存6~24 h。

1.2.5 单一酶水解模型建立 通过单一酶作用参数试验，确定每个酶作用的最佳浓度和时间后，固定每个酶作用时间为所有酶中最优作用时间最长者为准，作弄浓度为每个酶各自的最优浓度，考察不同pH和温度条件下，每个酶的水解率。

水解率=（对照样品被检测物质质量分数-被检测物质质量分数）/对照样品被检测物质质量分数

试验所选3种酶的pH和温度范围分别为2.5~ 6.0，10~60℃，最优pH值和温度分别是3.5~4.8，50℃，因此试验参数围绕此范围设定如下均匀试验（见表2）。

复合酶条件优化对烟梗品质提升研究

杨乾栩1， 和智君1， 杨 蕾2， 张天栋1， 曽晓鹰1， 王保兴1， 杨 清*1

（1.云南中烟工业有限责任公司 技术中心，云南 昆明 650231；2.昆明理工大学 环境科学与工程学院，云南 昆明650500）

为提升烟梗品质，降低烟梗中大分子蛋白质、果胶和纤维素含量，发展了烟梗的酸性蛋白酶-果胶酶-纤维素酶的复合酶水解方法，并采用全局搜索方法对复合酶的水解条件进行了优化和验证。……