高菲菲，薛恺，王酉（上海市第八人民医院，上海005；复旦大学附属肿瘤医院；上海交通大学附属仁济医院）



卵巢上皮癌组织中CRM1、P-p27ser10表达及其对癌细胞增殖的影响

高菲菲1，薛恺2，王酉3
（1上海市第八人民医院，上海200235；2复旦大学附属肿瘤医院；3上海交通大学附属仁济医院）

摘要：目的 观察卵巢上皮癌（EOC）组织中出核因子1（CRM1）和10号位丝氨酸（S10）磷酸化p27（P-p27ser10）的表达，并探讨二者对EOC细胞株SKOV3增殖的影响。方法 取64例手术切除的EOC组织，采用免疫组化法检测P-p27ser10、CRM1蛋白表达，分析二者与临床病理特征的关系。以p27野生型［p27（WT）］为模板，构建S10突变的p27去磷酸化突变细胞［p27（S10A）组］和拟磷酸化突变细胞［p27（S10D）组］，分别转染S10磷酸化通路相关分子CRM1 siRNA和siRNA阴性质粒到p27（S10D）细胞，建立S10D＋siCRM1组和S10D＋sictrl组，CCK-8法检测p27 （WT）、p27（S10A）、阴性对照、S10D＋siCRM1和S10D＋sictrl组细胞的增殖情况，流式细胞仪分析各组细胞周期。结果 P-p27ser10和CRM1在卵巢癌组织中的高表达率分别为76．6%、64．1%，其表达升高与卵巢癌的组织学分级、病理分期有关（P均＜0．05），二者表达呈正相关（r＝0．656，P＜0．01）。S10D＋sictrl组较S10A组G1／S期细胞比例明显减少，S10D＋siCRM1组较S10D＋sictrl组G1／S期细胞比例明显增多（P均＜0．05）。S10D＋sictrl组细胞增殖较S10A组加快，S10D＋siCRM1组较S10D＋sictrl组减慢（P均＜0．05）。结论 EOC组织中CRM1和P-p27ser10表达升高；CRM1参与了p27 S10磷酸化的出核降解过程，抑制p27 S10磷酸化及CRM1表达均可引起细胞周期阻滞，降低EOC细胞的增殖能力。

关键词：卵巢肿瘤；p27蛋白；10号位丝氨酸；磷酸化；出核因子1；细胞增殖

肿瘤细胞的过度增生与肿瘤细胞增殖周期调控因子紊乱有关。p27蛋白是一种细胞周期激酶（CDK）抑制剂，可负性调控细胞周期，使细胞周期停滞在G1期［1］。p27主要在细胞核内发挥抑癌基因作用，其亚细胞定位在很大程度上影响生物学功能［2］。……