杨　锐,郭玉荣,魏晓红,孔玉洁,朱丽林

(1.张掖市甘州区人民医院检验科,甘肃张掖 734000;2.张掖市民乐县人民医院检验科,甘肃张掖734500)



·论著·

86株库克菌的鉴定与抗菌药物敏感性试验

杨锐1,郭玉荣2,魏晓红1,孔玉洁1,朱丽林2

(1.张掖市甘州区人民医院检验科,甘肃张掖 734000;2.张掖市民乐县人民医院检验科,甘肃张掖734500)

摘要:目的对医疗环境中分离的库克菌进行鉴定与抗菌药物敏感性试验，为临床经验治疗库克菌感染提供循证医学证据。方法收集在医院感染卫生学监测中，采集医务人员手、皮肤黏膜、空气、物体表面等样本中离的 86 株库克菌，应用ATB Expression半自动细菌鉴定药敏分析仪配套ID32Staph鉴定试条和Staph 5药敏试条，进行菌株鉴定和药敏试验。结果86株库克菌鉴定检出玫瑰库克菌62株、变异库克菌16株、克库克菌8株。库克菌对诺氟沙星(16.3%)和呋喃妥因(20.9%)敏感率较低，对红霉素(69.3%)和庆大霉素(67.4%)敏感率接近70.0%，对青霉素等其他12种抗菌药物敏感度在80.0%以上，甚至为100.0%。结论库克菌对大多数敏感，临床医生和微生物检验人员应加强库克菌临床感染认识和诊治水平，合理使用抗菌药物。

关键词:库克氏菌;鉴定;药物敏感试验

库克菌是需氧生长的革兰阳性球菌，广泛分布于自然界空气、水、土壤中，一般被认为是无害的腐生菌，寄生或污染人体皮肤、黏膜，也可累积口咽部，是重要的机会致病菌。近年来库克氏菌引发的临床感染数量和类型不断增加，可引起呼吸道感染、泌尿、生殖系感染、皮肤软组织感染、消化道感染、血流感染等人体所有组织系统感染，须引起临床医生和微生物检验人员的高度重视。研究者对常规医院感染卫生学监测中分离的86 株库克氏菌进行菌株鉴定与抗菌药物敏感性试验，现报道如下。

1材料与方法

1.1菌株来源2013年1月至2014年6月医院感染卫生学监测中采集医务人员手、皮肤黏膜、空气、物体表面等样本中分离的86株库克氏菌。

1.2仪器与试剂法国梅里埃ATB Expression半自动细菌鉴定及药敏分析仪。ID32 Staph鉴定试条和配套试剂、ATB Staph 5药敏试条、显色触酶试剂、血浆凝固酶试剂由法国生物梅里埃公司提供。试验用革兰染色液、葡萄糖(OF)、乳糖、甘露糖、氧化酶、7.5%NaCl、硝酸盐还原、明胶水解、枸橼酸盐、七叶苷、甘油等生化反应管购自杭州天和微生物公司。哥伦比亚血琼脂平板，营养琼脂平板购自英国Oxoid公司。

1.3菌株鉴定和药敏试验细菌分离培养鉴定参照《全国临床检验操作规程(第3版)》执行。库克氏菌的属间鉴定从菌落形态、性状、色素、生长速度等做初步判定，再依据镜下形态、排列方式、有无鞭毛、有无荚膜等特性，根据触酶、氧化发酵试验、氧化酶试验(改良法)、杆菌肽、红霉素和呋喃唑酮敏感性试验等试验生化反应做出鉴定[1]，联合应用ATB Expression半自动微生物仪鉴定到种，仪器提示的种间鉴别补充实验用生化反应管完成。采用法国梅里埃ATB Staph 5药敏试条，用ATB比浊仪调节麦氏单位菌悬液，用ATB电子加样枪精确的在每个实验杯中加入135 μL菌悬液，完成86株库克氏菌对16种抗菌药物敏感试验。依照厂商说明书推荐的方法认真操作。

1.4质量控制细菌鉴定药敏仪由专人负责保养、维护、校准，保证仪器设备的正常运行。质控菌株金黄色葡萄球菌(ATCC29213)，对照菌株藤黄微球菌(CMCC28001)购自杭州天和微生物公司。

2结果

2.1鉴定结果86株库克氏菌鉴定检出玫瑰库克菌62株、变异库克菌16株、克氏库克菌8株。

2.2药敏结果86株库克氏菌除对诺氟沙星(16.3%)和呋喃妥因(20.9%)敏感率较低，对红霉素(69.3%)和庆大霉素(67.4%)敏感率接近70.0%，对青霉素等其他12种抗菌药物敏感性在80.0%以上，甚至100.0%。见表1。

3讨论

人类与外环境的接触是持续的、密切的，环境中存在着很多对人致病的微生物，尤其是在医院这个特殊的环境中，病原体种类繁多、来源广泛，很多细菌呈高度耐药性，患者又往往存在着一些易感因素。因此，病原体很容易侵入机体引起感染[2]。

库克菌以前被称作四联球菌、乳葡萄球菌及微球菌等。在医院环境分布广泛，是人体的皮肤及呼吸道黏膜表面的正常菌群。2010年有研究报道[3]，1株玫瑰色库克菌引发青壮年手拇指及鱼际间隙感染，该菌有溶血毒素，初代培养菌落周围出现透明溶血环，对青霉素、氨苄青霉素、红霉素、克林霉素、庆大霉素、左氧氟沙星、利福平、呋喃妥因、四环素、米诺环素、复方磺胺甲噁唑、万古霉素等多种抗菌药物敏感。检索中国知网，万方数据库，并复习文献发现库克氏菌可引起呼吸道感染、泌尿生殖系感染、皮肤软组织感染、消化道感染、血流感染等人体所有组织系统感染，其中血流感染报道居多。早在1985年李云珠等[4]就报道上海第二医科大学附属瑞金医院儿内科新生儿机会菌感染性败血症38例，其中检出四联球菌12株；2000年张华彬等[5]报道烧伤四联球菌败血症33 例报告；2006年魏升云[6]报道新生儿玫瑰色微球菌感染8例，其中6例确诊为新生儿败血症。以往临床微生物试验室认为库克菌(四联球菌或微球菌)，是自然环境及人体的非致病菌，血培养和伤口中分离的四联球菌常以“污染”菌对待,在临床上未引起重视。近年来库克氏菌除临床感染数量和类型不断增加外，对常用抗菌药物均有不同程度耐药，更有多重耐药现象[7],已是临床重要的机会致病菌，临床医生和微生物检验人员要高度重视，循证、合理使用抗菌药物,以减少耐药菌株的产生。目前，国内外尚没有针对库克氏菌的药敏方法和标准，国内也没有报道过有关库克氏菌对抗菌药物敏感性方面的内容。国内外自动化细菌鉴定及药敏分析系统一般提供革兰阳性球菌药敏和革兰阴性杆菌药敏两种试验板条，研究者考虑库克氏菌与葡萄球菌同属于微球菌科，生物学特性很相近，所以尝试应用法国梅里埃ATB Expression半自动细菌鉴定及药敏分析仪配套ATB Staph 5药敏试条，对库克氏菌进行药敏试验，结果判断准确，重复性好。显示库克氏菌对大多数抗菌药物敏感，除对诺氟沙星(16.3%)和呋喃妥因(20.9%)敏感率低，对红霉素(69.3%)和庆大霉素(67.4%)敏感率在接近70.0%，对青霉素等其他12种抗菌药物敏感性在80.0%以上，甚至100.0%。为临床经验治疗库克氏菌感染提供循证医学证据。

多年以来，库克氏菌(微球菌)一直被认为是机会致病菌，当机体患某些疾病(糖尿病、肝硬化、肿瘤等)导致防御机能减退时，或有侵入性的诊疗措施(透析、穿刺、放置导管等)，以及新生儿、婴幼儿、老年人等低免疫人群才可能发生感染。2013年李世荣等[8]报道1例玫瑰色库克菌导致正常免疫力成人发生败血症。因此，加强医院临床微生物学实验室学科的建设，积极开展病原学检验，深入研究和监测库克氏菌感染特征，对抗菌药物的敏感性特点,协助临床根据药敏试验结果合理使用抗菌药物,从而有效地预防、控制和治疗库克氏菌感染,提高诊疗效果。

参考文献

[1]陈东科，孙长贵．实用临床微生物学检验与图谱[M]．北京：人民卫生出版社，2011：185-194．

[2]陈萍，陈伟，刘丁．医院感染学教程[M]．北京：人民卫生出版社，2003：38．

[3]杨锐．玫瑰色库克菌致手深部感染1例[J]．临床检验杂志，2010，28(3)：174．

[4]李云珠，陈舜年，俞善昌．新生儿机会菌感染性败血症(附38例临床报告)[J]．临床儿科杂志，1985，9(5)：284-285．

[5]张华彬，叶尔明，王典齐，等．烧伤四联球菌败血症33例报告[J]．广东医学，2000，21(9)：773-774．

[6]魏升云．新生儿玫瑰色微球菌感染8例临床分析[J]．中国儿童保健杂志，2006，14(5)：529-530．

[7]赵德军，张碧霞，曹雁，等．血中检出多药耐药玫瑰微球菌1例[J]．中华医院感染学杂志，2007，17(12)：1585．

[8]李世荣，王红，任爱民，等．玫瑰色库克菌致正常免疫力成人败血症1例[J]．中国医刊，2013，48(2)：109-110．

86 strains of Kocuria bacteria identification and antimicrobial susceptibility test

YangRui1,GuoYurong2,WeiXiaohong1,KongYujie1,ZhuLilin2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory，ZhangyeMunicipalGanzhouDistrictPeople′sHospitalofGansu，Zhangye,Gansu734000,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,ZhangyeMunicipalMinleCountyPeople′sHospitalofGansu，Zhangye,Gansu734500,China)

Abstract:ObjectiveTo provide clinical experience in treatment of cook′s fungus infection of evidence-based medical evidence,separation of medical environment of cook′s bacteria identification and antimicrobial susceptibility test.MethodsCollected in the hospital infection of hygiene monitoring,collection and medical staff hands,skin and mucous membrane,air and object surface samples from 86 strains of cook,application ATB Expression semi-automatic bacteria identification of susceptibility analyzer supporting article try ID32 Staph identification and drug susceptibility test Staph 5,strain identification and drug sensitive test.Results86 strains bacteria identification cook 62 strains bacteria,mutation detection rose cook bacteria strains of 16,cook eight strains of bacteria.Cook bacterium of norfloxacin(16.3%),and with nitrofurantoin low because of the sensitive rate(20.9%),of erythromycin(69.3%) and gentamycin(67.4%),the sensitive rate at nearly 70.0%,sensitivity to penicillin and other 12 kinds of antimicrobial agents more than 80.0%,even 100.0%.ConclusionCook for most still sensitive,clinicians and microorganism inspection personnel should strengthen the cook.

Key words:Kocuria；identification；drug sensitive test

(收稿日期：2015-12-22)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.024

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)09-1214-03

作者简介：杨锐，男，副主任检验技师，主要从事临床微生物检验研究。