原料乳中玉米赤霉烯酮胶体金免疫试纸条检测方法的建立
2016-02-20,
,
(1.东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室哈尔滨150030;2.国家乳业工程技术研究中心,哈尔滨150028)
原料乳中玉米赤霉烯酮胶体金免疫试纸条检测方法的建立
丁木1,姜霞1,王蕊1,孙露宏1,周文琦1,赵玥明1,满朝新2,姜毓君1,2
(1.东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室哈尔滨150030;2.国家乳业工程技术研究中心,哈尔滨150028)
采用柠檬酸三钠法合成胶体金,与抗玉米赤霉烯酮单抗(ZEA-mAb)制成抗体-胶体金标记物,包被于胶体金结合垫上。玉米赤霉烯酮半抗原和蛋白的偶联物(ZEA-BSA)和羊抗鼠IgG分别喷涂于硝酸纤维素膜作为检测线(T线)和质控线(C线),建立原料乳中玉米赤霉烯酮(ZEA)的胶体金免疫试纸条检测法。结果显示,试纸条的灵敏度为30n g/mL,与其他毒素无交叉反应,10 min内即可肉眼观察结果。检测添加有玉米赤霉烯酮的原料乳样品,该试纸条的检测限为50 ng/mL。方法可用于原料乳中玉米赤霉烯酮的快速检测。
玉米赤霉烯酮;试纸条;原料乳
0 引言
玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)是由多种镰刀真菌产生,易导致不孕、流产[1];此外,还具有细胞毒性、免疫毒性[2-3],严重威胁人类健康。ZEA主要存在于作物中[4-5],会严重影响以谷物为饲料的反刍动物生产,影响乳的品质。我国饲料卫生标准中规定玉米类饲料中ZEA质量分数不准超过500 μg/kg,GB 2761中规定谷物及其制品中ZEA不超过60 μg/kg。
目前用于测定ZEA的方法,如:薄层层析(thin-layer chromatography,TLC)、气相色谱法(gas chromatography,GC)[6-8],通常需要大型设备、复杂的前处理及专业的操作人员。而胶体金免疫层析技术(Colloidal gold immunochromatographic assay,GICA)[9-10]具有方便操作、检测快速、不需特殊设备和人员培训等优点,特别适合于大批量的检测。……
