大鼠被动皮肤过敏反应实验条件的优化
2016-02-14陈文培张子扬周成浩郭宇琳林宝琴
陈文培,张子扬,周成浩,刘 涵,胥 彤,郭宇琳,林宝琴
(广州中医药大学中药学院,广东广州 510006)
·实验方法·
大鼠被动皮肤过敏反应实验条件的优化
陈文培,张子扬,周成浩,刘 涵,胥 彤,郭宇琳,林宝琴
(广州中医药大学中药学院,广东广州 510006)
目的通过卵白蛋白(OVA)致敏大鼠优化被动皮肤过敏反应(PCA)的实验条件。方法1 ~2月龄SD大鼠ip给予OVA(每只0.2,1.0和5.0 mg)与弗氏完全佐剂的混合乳液,隔日1次,共3次,进行致敏。分别于末次致敏后1,3,5,7,10,12,14,16和18 d用ELISA检测血清总IgE(T-IgE)水平和OVA特异性IgE(OVA-sIgE)水平。大鼠致敏后12 ~16 d制备致敏血清。大鼠皮内注射致敏血清被动皮肤致敏后,于0.5,1.5,3,6,12,24,36,48和60 h后iv给予同等剂量OVA和伊文思蓝激发,于激发后10,30和60 min测量大鼠皮肤蓝斑直径。结果OVA致敏大鼠血清T-IgE和OVA-sIgE水平分别于末次致敏后3 ~7 d和12 ~16 d达高峰;在OVA 0.2 ~5.0 mg剂量范围内,OVA-sIgE与T-IgE水平无明显关联性;OVA 1.0和5.0 mg致敏大鼠血清能诱发大鼠PCA;皮内注射致敏血清0.5 ~3 h后激发的皮肤蓝斑形态规则,范围最大;激发后30 ~60 min检测的皮肤蓝斑范围大,界线清晰,形状规则,且着色较深。结论PCA优化条件为1 ~2月龄大鼠隔日每只ip给予OVA 1.0 ~5.0 mg,共致敏3次,致敏后12 ~16 d制备致敏血清。在被动皮肤致敏0.5 ~3 h后,进行激发,30 ~60 min后检测皮肤内层蓝斑直径。
卵白蛋白;Ⅰ型过敏反应;IgE;被动皮肤过敏反应;大鼠
过敏反应又称超敏反应。根据病理机制和临床特点,过敏反应分为4型,其中Ⅰ型过敏反应由免疫球蛋白E(IgE)介导[1],其机制为过敏原刺激呼吸道和消化道黏膜固有层淋巴组织中的B细胞转变为浆细胞,浆细胞释放IgE抗体。IgE抗体与肥大细胞或嗜碱性粒细胞膜上的特异受体结合,使机体处于致敏状态。……
