俞雪锋，蒋 曦，王国康，张佳佳，赵应征，潘建春

（1.浙江医药高等专科学校，浙江宁波 315000；2.浙江大学明州医院，浙江宁波 315000；3.温州医科大学，浙江温州 325035）

·论 著·

阿魏酸对脊髓损伤大鼠微管相关蛋白轻链3、Beclin1、Bcl-2和Bax表达的影响

俞雪锋1，蒋 曦2，3，王国康1，张佳佳1，赵应征3，潘建春3

（1.浙江医药高等专科学校，浙江宁波 315000；2.浙江大学明州医院，浙江宁波 315000；3.温州医科大学，浙江温州 325035）

目的研究阿魏酸（FA）对脊髓损伤（SCI）模型大鼠的改善作用及其对微管相关蛋白轻链3（LC3）、人卷曲螺旋肌球蛋白样BCL-2结合蛋白/自噬基因1（Beclin1）、Bcl-2和Bax表达的影响。方法采用脊髓压迫损伤动物模型，即动脉钳夹闭脊髓2 min造成SCI。实验分为假手术组、模型6 h，1，3，7和14 d组、FA 100 mg·kg-1（术后po，每天2次）给药6 h，1，3，7和14 d组。SCI后，进行BBB评分和斜板功能评分，随后处死大鼠，取脊髓进行HE染色，采用免疫组织染色法检测LC3和Beclin1蛋白，采用Western蛋白印迹法检测LC-3，Beclin1，Bcl-2和Bax蛋白表达。结果与假手术组相比，模型6 h组BBB评分和斜板功能评分明显下降，分别由21分和70°下降为（0.5±0.5）分和（5.8±2.0）°；而FA给药7 d后BBB评分由模型7 d组的3.0±1.7上升为6.2±3.6（P<0.05），斜板功能评分则由（13.3±4.1）°上升为（26.7±8.7）°（P<0.01）；HE染色发现，SCI损伤后出现组织水肿，结构呈空洞状；FA给药7 ～14 d，脊髓内部水肿及结构空洞得到改善。West⁃ern蛋白印迹法检测结果显示，SCI损伤后1 d，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin1表达增加（P<0.01），14 d组蛋白表达相比于1 d组下降（P<0.05）；相对于自噬蛋白，抗凋亡蛋白Bcl-2表达增加，并且Bcl-2与致凋亡蛋白Bax的比值增加（P<0.05）。SCI损伤后给予FA，相比于SCI模型组，1 d组LC3和Beclin1表达增加（P<0.05）；14 d组Bcl-2表达明显增加，其与Bax比值增加更为显著（P<0.05）。结论SCI后可能存在着自噬先增强后减弱的发展过程，而抗凋亡作用可能存在着逐渐增强的趋势。FA对SCI具有潜在的治疗作用，其机制可能涉及对自噬和凋亡的影响。

阿魏酸；脊髓损伤；细胞凋亡；自噬

脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）是一种可逆性差、致残率高的中枢神经系统创伤性疾病，发生率逐年增高且呈年轻化趋势，且其治疗也一直是医学界的重点和难点。SCI按病理、生理学机制可分为原发性和继发性损伤。因原发性损伤的不可逆性，目前研究的焦点主要集中于继发性SCI。继发性SCI主要表现为神经受损。自噬和凋亡作为细胞程序性死亡的2种重要方式［1］，是目前SCI后细胞死亡机制的研究热点。

目前，治疗SCI的特效药物几乎不存在，围绕自噬与凋亡机制展开的药物研究成为焦点。……