SUMO-1基因沉默对人肺腺癌细胞增殖及侵袭的影响

(1天津医科大学总医院，天津300052；2天津医科大学肿瘤医院)

摘要：目的观察小泛素相关修饰因子1(SUMO-1)基因沉默后人肺腺癌A549细胞的增殖及侵袭能力变化，探讨SUMO-1在肺腺癌发病中的作用。方法培养肺腺癌A549细胞，分为RNA干扰(siRNA)组、阴性对照组及空白对照组。设计SUMO-1 siRNA片段，将SUMO-1 siRNA片段及阴性对照siNC片段分别转染siRNA组及阴性对照组细胞，空白对照组不转染。转染 72 h 后，收集各组细胞，采用RT-PCR法检测SUMO-1 mRNA表达；采用蛋白印迹法检测SUMO-1蛋白表达；采用MTT法检测转染后24、48、72 h的细胞增殖情况，计算细胞增殖抑制率；采用Transwell小室测算转染后侵袭细胞数。结果转染后siRNA组SUMO-1 mRNA及蛋白表达均低于阴性对照组及空白对照组(P均<0.01)。siRNA组各时间点细胞增殖抑制率均高于空白对照组及阴性对照组(P均<0.05)。siRNA组、阴性对照组、空白对照组转染后的侵袭细胞数分别为(36.0± 9.8)、(103.3± 14.0)、(117.3± 13.5)个，siRNA组侵袭细胞数均少于阴性对照组及空白对照组(P均<0.01)。结论 沉默SUMO-1基因可抑制A549细胞的增殖及侵袭能力,SUMO-1具有促进肺腺癌发生、发展的作用。

关键词：肺腺癌；RNA干扰；基因沉默；小泛素相关修饰蛋白类；增殖；侵袭

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.42.010

中图分类号：R730.231；R734.2 文献标志码：A

收稿日期：(2015-08-01)

肺腺癌是起源于支气管黏膜或腺体的恶性肿瘤，易发生复发和转移。小泛素相关修饰因子(SUMO)是一种泛素样分子，主要参与蛋白质翻译后修饰过程。SUMO-1基因是SUMO家族中的一员，在胃癌[1]、结肠癌[2]、乳腺癌[3]、口腔鳞癌[4]、淋巴瘤[5]等多种肿瘤中表达增高。研究发现，肺癌组织中SUMO-1表达增高[6]。但目前对于SUMO-1在肺腺癌细胞内表达的研究较少。2014年9月～2015年2月，我们采用RNA干扰(siRNA)技术转染人肺腺癌 A549细胞，观察SUMO-1基因沉默后A549细胞的增殖及侵袭能力变化，探讨SUMO-1在肺腺癌发病中的作用。

1材料与方法

1.1材料人肺腺癌 A549细胞购自中科院上海细胞库；RPMI 1640培养基、Opti-MEM培养基及胎牛血清购自Life Technologies公司；阳离子脂质体 Lipofectamine2000、噻唑蓝(MTT)购自Sigma公司；……