蒿长英 陈明霞 马文斌 郭平 吕海波 刘晔 连增林

摘要：目的 探讨糖网明目颗粒不同提取部位对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞EA.hy926中血管内皮细胞生长因子（VEGF）和白细胞介素（IL）-1α基因和蛋白表达的作用机制。方法 人脐静脉内皮细胞EA.hy926分为空白组、高糖组、全方组、部位1（苷类和黄酮类）组、部位2（有机酸类和多糖类）组和部位3（生物碱类）组。以D-葡萄糖干预细胞复制高糖模型，半定量RT-PCR检测糖网明目颗粒不同提取部位对高糖诱导细胞中VEGF和IL-1α的基因表达；ELISA检测糖网明目颗粒不同提取部位对高糖诱导的细胞中VEGF和IL-1α的蛋白表达。结果 高糖导致EA.hy926细胞VEGF和IL-1α mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.05）。糖网明目颗粒及其不同提取部位干预细胞后，VEGF和IL-1α基因和蛋白表达显著降低（P<0.05），变化幅度依次为：部位1>部位3>部位2。结论 糖网明目颗粒中苷类和黄酮类、生物碱类及有机酸类和多糖类调控高糖诱导的血管内皮细胞VEGF和IL-1α表达的作用强度依次减弱。

关键词：糖网明目颗粒；糖尿病视网膜病变；人脐静脉内皮细胞EA.hy926；血管内皮细胞生长因子；白细胞介素-1α

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.01.013

中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2016）01-0056-04

Effects of Different Extracts of Tangwang Mingmu Granules on High Glucose Induced VEGF and IL-1α Expressions in Vascular Endothelial Cells HAO Chang-ying1， CHEN Ming-xia2， MA Wen-bin1， GUO Ping3， LV Hai-bo3， LIU Ye4， LIAN Zeng-lin4 （1. Beijing Red Sun Pharmaceutical Co.， Ltd.， Handian Group， Beijing 100103， China； 2. Beijing University of Chinese Medicine， Beijing 100102， China； 3. Beijing Handian Pharmaceutical Co.， Ltd， Handian Group， Beijing 100103， China； 4. Beijing Handian Academy of Chinese Medicine， Handian Group， Beijing 100103， China）

Abstract： Objective To observe the mechanism of action of different extracts of Tangwang Mingmu Granules on high glucose induced VEGF and IL-1α gene and protein expressions in vascular endothelial cells. Methods Human umbilical vein endothelial cells EA.hy926 were divided into six groups： blank， high glucose， Tangwang Mingmu Granules， extract 1 （glycoside and flavonoid）， extract 2 （organic acid and polysaccharides） and extract 3 （alkaloids） groups. High concentration glucose was used to establish the high glucose model in EA.hy926 cells. The expressions of VEGF and IL-1α mRNA were detected by semi-quantitative RT-PCR. The contents of VEGF and IL-1α protein were tested by ELISA. Results The gene expression and protein levels of VEGF and IL-1α were significantly up-regulated under the high glucose condition （P<0.05）. However， the above indicators were significantly reduced after the treatment of Tangwang Mingmu Granules. The activity of different parts of Tangwang Mingmu Granules was as follows： extract 1> extract 3> extract 2. Conclusion The action intensity of glycosides and flavonoids， alkaloids， organic acids and polysaccharides on VEGF and IL-1α expression in Tangwang Mingmu Granules weakens in sequence.

Key words： Tangwang Mingmu Granules； diabetic retinopathy； human umbilical vein endothelial cells EA.hy926； VEGF； IL-1α

糖网明目颗粒用于治疗糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）。本课题前期研究结果表明，糖网明目颗粒能明显改善糖尿病大鼠视网膜微血管病理学状态，降低血管生成相关因子的蛋白和基因水平[1-2]。本实验采用血管内皮细胞高糖模型，进一步探讨糖网明目颗粒不同提取部位对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞EA.hy926中血管内皮细胞生长因子（VEGF）和白细胞介素-1α（IL-1α）基因和蛋白表达的作用机制。

1 实验材料

1.1 细胞

人脐静脉内皮细胞EA.hy 926购于中国科学院上海细胞库。