崔 佳，万翠香(长治医学院微生物学教研室，长治 046000;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室;通讯作者，E-mail:cuixiangwan@ncu．edu．cn)

人纤溶酶原(plasminogen，Plg)是由810个氨基酸多肽构成的糖蛋白，分子量约92 kD，成熟的Plg包括N端多肽NTP，5个同源的三角区(K1－K5)及丝氨酸蛋白酶(SP)区。在碱性条件(pH 11．0)下，纤溶酶限制性降解纤溶酶原Arg530-Lys531位上的肽键，特异性降解出由261个氨基酸残基构成的SP区，即微小纤溶酶原(microplasminogen，μplg)，它完全保留了纤溶酶原的丝氨酸蛋白酶(SP)活性区，并可被纤溶酶原激活剂激活后形成微小纤溶酶，具有纤溶活性［1－3］。

Plg的大多数抑制剂是丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族(serpin superfamily)的成员［3］，包括 α2－ 抗纤溶酶(α2-AP)、PA抑制物(PAI)，它们分别调控纤溶酶plasmin和Plg激活剂PA。

2006年，瑞士雀巢研究中心预测并报道了长双歧杆菌NCC2705中一类具有丝氨酸蛋白酶抑制剂活性的外膜蛋白Serpin的存在，推测了Serpin的作用可能是抵抗外源蛋白酶的消化，并为双歧杆菌在宿主肠道内的定植提供一个极其重要而有利的竞争条件［4］。本实验室在前期的研究工作中已成功从长双歧杆菌中分离到Serpin外膜蛋白，使之在原核表达体系中大量表达，并且得到了高纯度的Serpin蛋白。最新文献报道，人Plg可与双歧杆菌一些表面蛋白黏附［5］，然而未有关于Plg与Serpin表面蛋白相互作用的报道，依据Plg结构中有丝氨酸蛋白酶结构域，我们推测Plg也能与双歧杆菌的Serpin表面蛋白相互作用，并且实验加以验证。

1 材料与方法

1．1 菌株与质粒

菌株:E．coli．DH5α、BL21(DE3)来源于南昌大学食品科学与技术国家重点实验室。质粒:pDNR-plg购自于德国Thermo公司、pET22b(+)、T载体购自于TaKaRa公司。……