张明鑫，何 平，张灵敏，王景杰(第四军医大学唐都医院消化内科，西安 70038;西安交通大学第一附属医院麻醉科; 通讯作者，E-mail:jingjie@fmmu．edu．cn)

麻醉作为肿瘤外科手术必不可少的环节之一，在肿瘤手术治疗中发挥重要的作用，其对肿瘤治疗的影响受到越来越多的关注。最初的研究证实不同的麻醉方式(局麻vs全麻)可影响免疫系统而影响肿瘤的预后，进一步研究发现麻醉药物不仅对免疫系统产生影响，同时还可以直接作用于肿瘤细胞［1－3］。芬太尼等在癌症患者手术、术后镇痛及癌痛治疗中应用广泛。已有研究证实，芬太尼可以抑制肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌等肿瘤的恶性生物学行为，但对食管癌侵袭的影响罕见报道［4－9］。大量研究表明，基质金属蛋白酶 2(matrix metalloproteinase 2，MMP-2)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9，MMP-9)与肿瘤的侵袭密切相关［11，12］。本研究探讨了不同剂量芬太尼对食管鳞癌细胞株Eca109侵袭能力的影响及其对基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2，MMP-2)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9，MMP-9)表达的影响。

1 材料与方法

1．1 细胞株及主要试剂

人食管鳞癌细胞系Eca109购自中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库。RPMI-1640培养基、0．25%胰蛋白酶购自美国HyClone公司，胎牛血清购自美国HyClone公司，MMP-2(sc-6838)和MMP-9多克隆抗体(sc-6840)及释辣根酶标记兔抗山羊IgG二抗购自美国santa cruz公司。

1．2 细胞培养

常规培养于含胎牛血清100 ml/L、青霉素100 U/ml、链霉素100 ng/ml的RPMI 1640培养基中，培养条件为37℃、50 ml/L CO2的湿润无菌环境。根据细胞生长状况每48－72 h传代1次。

1．3 芬太尼干预

取对数生长的Eca109细胞，按照实验需要接种于不同浓度不同的培养板中，常规培养至转染当天至细胞密度为50%左右，每组3个复孔。……