黄　敏，卢根林，斯伟宏，吴爱兵

硫化氢对急性胰腺炎患者血液流变学的影响

黄敏1，卢根林1，斯伟宏1，吴爱兵2

目的：研究硫化氢（H2S）对急性胰腺炎患者血液流变学的影响。方法：选取重症急性胰腺炎患者（A组）、轻型急性胰腺炎患者（B组）和健康对照者（C组）各40例，留取静脉血测定H2S、血液流变学指标、单核细胞蛋白酶激活受体-1 (PAR-1)、组织因子(TF)等含量变化，藉此评价H2S对急性胰腺炎患者血液流变学的影响。结果：A组红细胞聚集指数、血沉、血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度等均显著高于B组、C组，B组显著高于C组（P＜0.01）；A组H2S、PAR-1、TF分别为（42.57±7.18）μmol/L、38.53±9.84、（344.24±28.47）ng/L，也分别高于B组的（35.27±3.14）μmol/L、23.42±5.16、（271.67±31.45）ng/L、C组的（24.38±2.69）μmol/L、4.53±2.12、（5.63±3.24）ng/L，B组的这3个指标值分别高于C组的值（P＜0.01）。H2S与红细胞聚集指数、血沉、血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度、PAR-1、TF呈正相关（r分别为0.87、0.74、0.81、0.67、0.78、0.87、0.86, P＜0.01）。结论：内源性H2S是一种炎症介质，上调TF、PAR-1表达，引起急性胰腺炎患者血液流变学指标异常。

急性胰腺炎；硫化氢；血液流变学

硫化氢（H2S）是继一氧化氮（NO）和一氧化碳（CO）之后的第三气体信号分子，由胱硫醚-β-合成酶(CBS)、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)催化L-半胱氨酸代谢产生[1-2]。H2S保护肠缺血-再灌注损伤大鼠小肠黏膜屏障[3]、肝脏功能[1-4]。硫化氢在急性胰腺炎发病机制中充当炎症因子[5-7]，但对急性胰腺炎患者血液流变学的影响，国内外文献鲜见报道，为此，我们选取重症急性胰腺炎患者、轻型急性胰腺炎患者以及健康对照者作为研究对象，抽取静脉血测定H2S含量，评价其对急性胰腺炎血液流变学的影响。

1　材料与方法

1.1临床资料选取2001年1月—2012年9月间在浙江省义乌中心医院住院的重症急性胰腺炎(A组)、轻型急性胰腺炎(B组)患者各40例，均符合急性胰腺炎国际共识-2012年亚特兰大修订版诊断标准[8]，同期健康体检者40例为健康对照组(C组)，均无高血压、慢性阻塞性肺疾病、冠心病、糖尿病等基础疾病。A组男22例，女18例；年龄（50±12）岁，体重（53.2±7.2）kg，病程（24.5±8.3）h；B组男性21例，女性19例；年龄（47±14）岁，体重（49.6±9.3）kg，病程（26.7±6.8）h。C组男17例，女23例；年龄（53±19）岁，体重（50.3±8.6）kg。3组间年龄、体重、性别比无统计学差异，A、B组病程比较无统计学差异（P＞0.05）。A、B组均有腹痛、恶心、呕吐表现，A组有低血压、少尿、呼吸窘迫等休克、急性肾功能、呼吸功能不全表现；A组增强CT示有胰腺坏死、胰周广泛渗出，B组仅有胰周渗出。A组并发有胰腺周围脓肿20例、胰腺脑病3例、消化道出血10例，7例经抢救无效死亡，B组无并发症、预后良好。本研究经医院伦理委员会批准，所有研究对象均知情同意。

1.2检测仪器及试剂敏感硫电极和PXS-270离子计购于上海雷磁仪器厂，血液流变学分析仪购于北京众驰伟业科技发展有限公司，人TF含量采用ELISA法检测，试剂盒购自美国Invitrogen公司。

1.3标本采集A、B组入院次日空腹时采取静脉血，健康对照组空腹时采血，用肝素抗凝。血液注入抗凝管后轻摇，使血液充分抗凝。

1.4检测指标及方法（1）敏感硫电极法[9]测定血浆H2S浓度，血液流变学分析仪测定血液流变学指标[10]，血浆TF水平检测取血离心后，留取血浆进行ELISA检测。（2）单核细胞蛋白酶激活受体-1 (PAR-1)表达[11]：收集、培养外周血单核细胞。于细胞悬液中加入1 μg/1×106细胞异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗人PAR-1抗体(美国Santa Cruz司)，4℃避光孵育15 mL，加入2 mL PBS洗涤1次，加入0.4 mL PBS后流式细胞仪检测其平均荧光强度。

1.5统计学处理采用SPSS 13.0统计软件，计量资料用均数±标准差(±s)表示，多样本均数比较采用单因素方差分析，多样本均数间两两比较用q检验，计数资料间比较采用χ2检验，两样本均数比较采用独立样本t检验，相关性采用直线相关分析。

2　结果

2.1各组血液流变学指标变化3组血液流变学指标变化见表1。A组红细胞聚集指数、血沉、血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度均显著高于B组、C组，B组显著高于C组（P＜0.01）。

表1　各组血液流变学指标变化（n=40，±s）

表1　各组血液流变学指标变化（n=40，±s）

注：与C组比较,aP＜0.01;与B组比较,bP＜0.01

组别A组B组C组F值血浆黏度5.01±0.10a、b 2.52±0.06a 1.42±0.08 6.45全血高切黏度（200 s-1）5.34±0.28a、b 3.85±0.32a 2.25±0.14 7.27全血低切黏度（1 s-1）13.67±0.64a、b 10.27±0.52a 6.32±0.48 8.12红细胞聚集指数0.247±0.027a、b 0.167±0.024a 0.089±0.019 5.98血沉（mm/h）40.78±4.25a、b 25.76±3.44a 18.79±2.14 21.47红细胞压积（%）32.97±3.53 33.18±6.16 35.63±7.17 2.28

2.2各组H2S、PAR-1、TF的含量变化3组血浆H2S、PAR-1、TF的含量检测结果见表2。A组H2S、PAR-1、TF均显著高于B组、C组，B组显著高于C组（P＜0.01）。

2.3相关性分析H2S与红细胞聚集指数、血沉、血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度、PAR-1、TF呈正相关，r分别为0.87、0.74、0.81、0.67、0.78、0.87、0.86，（P均＜0.01）；红细胞聚集指数、血沉、血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度与PAR-1呈正相关，r分别为0.52、0.56、0.63、0.58、0.72，（P均＜0.01）；与TF呈正相关，r分别为0.57、0.65、0.72、0.83、0.54，（P均＜0.01）。

3　讨论

血液流变学检测可用于诊断微循环障碍，血液黏度是红细胞聚集性、变形性、白细胞、血浆蛋白等血液组分流变特性的综合反应，低切变率时的血液黏度增高主要由红细胞聚集性产生，高切变率时的血液黏度主要由红细胞变形性产生[10]。本研究发现A、B组血液流变学指标（红细胞聚集指数、血沉、血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度）均增高C组，B组高于C组，提示急性胰腺炎患者存在着血液流变学指标异常，表现为高血粘滞综合征；急性胰腺炎患者病情越严重，血液流变学指标异常程度越显著。H2S是续NO和CO之后的第三气体信号分子，由CSE和CBS催化L-半胱氨酸代谢产生[1-2]。本研究结果显示H2S与红细胞聚集指数、血沉、血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度正相关，提示H2S引起急性胰腺炎患者血液流变学指标异常，且血H2S含量越高，血液流变学指标异常越显著。

表2 各组H2S、PAR-1、TF的水平变化比较（n=40，±s）

表2 各组H2S、PAR-1、TF的水平变化比较（n=40，±s）

注：与C组比较,aP＜0.01;与B组比较,bP＜0.01

组别A组B组C组F值H2S（μmol/L）42.57±7.18a、b35.27±3.14a24.38±2.69 11.24 PAR-1 38.53±9.84a、b23.42±5.16a14.53±2.12 15.67 TF(ng/L) 344.24±28.47a、b271.67±31.45a5.63±3.24 56.24

本研究示：重症急性胰腺炎组、轻型急性胰腺炎组血浆H2S水平均显著高于正常对照组（P＜0.01），提示H2S在急性胰腺炎疾病发病机制中充当炎症因子，与文献[5-7、12]一致。本研究结果还显示重症急性胰腺炎组血浆H2S显著高于轻型急性胰腺炎组（P＜0.01），A组并发有胰腺周围脓肿20例、胰腺脑病3例、消化道出血10例，7例经抢救无效死亡，B组无并发症、预后良好，提示血H2S含量越高，急性胰腺炎病情越重、预后越差、并发症发生率越高。

研究表明大量炎症介质释放是急性胰腺炎重要的病理生理学过程[13-15]。归咏刚等[11]研究发现机体在炎症介质的刺激下，TF表达增多，通过内、外凝血途径激活凝血系统，同时也抑制纤维蛋白的溶解，TF结合FⅦ后形成TF-FⅦα复合物，可激活凝血酶原形成凝血酶，TF-FⅦα复合物和凝血酶又可以结合单核细胞PAR-1，引起炎症因子TNF-α的合成和分泌。本研究发现A、B组患者TF、PAR-1均显著高于C组，A组显著高于B组，且TF、PAR-1均与红细胞聚集指数、血沉、血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度呈正相关，提示急性胰腺炎患者TF、PAR-1高表达，引起血液流变学指标异常；血TF、PAR-1含量越高，血液流变学指标异常程度越显著。本研究结果也显示H2S与TF、PAR-1正相关，提示内源性H2S上调TF、PAR-1表达，引起急性胰腺炎患者血液流变学指标异常。黄惊鸿等[10]研究表明H2S改善肠缺血-再灌注损伤大鼠血液流变学异常。故硫化氢对血液流变学指标的影响可能具有疾病特异性。

研究结果表明DL-炔丙基甘氨酸特异性阻断小鼠离体胰腺腺泡细胞CSE表达，显著抑制离体小鼠胰腺腺泡细胞P物质的合成、前激肽原-A和神经激肽-1受体的表达、内源性H2S的水平，减轻H2S对急性胰腺炎离体小鼠胰腺腺泡细胞的损伤[2、13、15]。本研究提示内源性H2S是一种炎症介质，上调TF、PAR-1表达，引起急性胰腺炎患者血液流变学指标异常。能否通过降低急性胰腺炎患者血H2S含量，达到纠正急性胰腺炎患者血液流变学指标异常的目的，有待于进一步研究明确。

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（收稿：2015-02-06修回：2015-04-26）

（责任编辑尚 东）

Influence of Hydrogen Sulfide on Haemorheology Parameter in Patients with Acute Pancreatitis

HUANG Min,LU Gen-lin,SI Wei-hong,et al.The First Department of General Surgery,Yiwu Central Hospi⁃tal,Yiwu（322000）,China.

ObjectiveTo study the influence of hydrogen sulfide on haemorheology parameter in patients with acute pancreatitis.MethodsForty patients suffered from severe acute pancreatitis were selected as group A,40 patients subjected to mild acute pancreatitis were distributed to group B.Healthy persons were in⁃cluded in control group.Blood was used to detect hydrogen sulfide,haemorheology parameter,protease activated receptor-l(PAR-1）of monocytes,tissue factor(TF）in order to investigate he influence of hydrogen sulfide on pa⁃tients'haemorheology parameter with acute pancreatitis..ResultsErythrocyte aggregation index,ESR,plasma viscosity,high blood viscosity,low blood viscosity in patients with severe acute pancreatitis,was significantly higher than that in patients of group B and C.Also,these parameters in group B were predominantly higher than in group C（P＜0.01）.H2S,PAR-1,TF in patients of group A were（42.57±7.18）μmol/L,38.53±9.84,（344.24± 28.47）ng/L respectively.In group B,they were（35.27±3.14）μmol/L,23.42±5.16 and（271.67±31.45）ng/L re⁃spectively.In group C,these values were（24.38±2.69）μmol/L,4.53±2.12,（5.63±3.24）ng/L.The three values in group A were obviously higher than those in group B and C.H2S positively correlated with erythrocyte aggre⁃gation index,ESR,plasma viscosity,high blood viscosity,low blood viscosity,PAR-1,TF（r=0.87,0.74,0.81,0.67, 0.78,0.87,0.86,respectively）.ConclusionEndoge⁃nous H2S,as a inflammatory factor,up-regulates PAR-1 and TF which makes haemorheology parame⁃ter abnormal in patients with acute pancreatitis.

Acute pancreatitis;hydrogen sulfide; haemorheology

R657.5+1

A

1007-6948(2015)03-0218-03

10.3969/j.issn.1007-6948.2015.03.002

国家自然科学基金青年科学基金项目(81201672)；义乌市人才引进项目科研启动基金项目（2012-R-04）

1.浙江省义乌中心医院普通外一科（义乌 322000）

2.广东医学院附属医院肿瘤中心（湛江 523808）

黄敏，E-mail：hm85209845@163.com