黄正勇　吴铁峰　钱　彩

浙江中医药大学附属温州中西医结合医院儿科，浙江温州325001

匹多莫德治疗传染性单核细胞增多症的临床疗效及对T淋巴细胞亚群的影响

黄正勇吴铁峰钱彩

浙江中医药大学附属温州中西医结合医院儿科，浙江温州325001

目的研究匹多莫德治疗传染性单核细胞增多症（IM）的临床疗效及对T淋巴细胞亚群的影响。方法采用流式细胞术检测了53例IM患儿和20名健康儿童外周血淋巴细胞亚群。将53例IM患儿随机分为两组，对照组25例和干预治疗组28例，两组均给予常规处理，IM干预组在常规治疗的基础上加用匹多莫德，予以比较。结果①与健康组比较，IM患儿CD3+、CD8+淋巴细胞上升明显（P＜0.01），CD4+淋巴细胞和CD4+/CD8+比值降低明显（P＜0.01）；②匹多莫德治疗两周后，CD3+、CD8+淋巴细胞比例降低，CD4+淋巴细胞比例及CD4+/CD8+比值明显升高，差异有显著性（P＜0.01）；③两组IM患儿的热程、咽峡炎缓解时间、淋巴结肿大消退时间及住院日均有显著差异（P＜0.05）。结论匹多莫德能改善IM患儿的细胞免疫功能，且有良好临床疗效。

传染性单核细胞增多症；T淋巴细胞亚群；匹多莫德

传染性单核细胞增多症（infectious mononucleosis，IM）主要是由EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）感染导致的急性传染病，其发病率呈上升趋势，临床表现以发热、咽峡炎、颈淋巴结及肝脾肿大，外周血可见淋巴细胞增加且出现异型淋巴细胞等为特征[1]，可进展为慢性活动性EBV感染（CAEBV）和EBV相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（EBV-HLH），并与部分恶性肿瘤相关。这些与EB病毒感染后的细胞免疫功能缺陷有关。目前该病无特效治疗，抗病毒及中药治疗效果并不明确，且部分药物副作用明显，故临床上以对症和支持治疗为主。本研究将我院的IM住院患儿作为观察对象，使用流式细胞仪检测IM患儿外周血的淋巴细胞亚群，并采用细胞免疫调节剂匹多莫德对部分IM患儿进行干预治疗，探讨其对T淋巴细胞亚群以及临床疗效的影响，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

选取2012年3月～2014年2月在我院儿内科住院治疗的53例IM患儿作为观察对象，符合IM的诊断标准[1]，均有典型临床症状体征：发热、咽峡炎和颈淋巴结肿大，血清EBV-IgM阳性。其中男31例，女22例，年龄1～12岁，随机分为两组：IM干预组（匹多莫德干预组）28例，平均（5.5±2.9）岁和对照组25例，平均（5.9±3.2）岁。两组患儿在性别、年龄、病程以及症状特点等方面的差异无显著性（P＞0.05），具有可比性，且近期均未使用过皮质激素或免疫调节剂。随机抽取本院儿保门诊体检儿童20名作为健康对照组，男12例，女8例，年龄1～12岁，平均（6.0±2.5）岁，与上述两组年龄性别比较差异均无显著性（P＞0.05）。三组儿童均否认既往有免疫低下及过敏性疾病史和过敏性疾病家族史。

1.2实验方法

IM干预组与IM对照组分别在入院时和治疗后的2周时间各采集静脉血1次，而健康对照组只采集静脉血1次，采血量2～3 mL，均使用EDTA作为抗凝剂，然后用美国Beckman-Coulter EPICSXL型流式细胞仪分别测定三组儿童的T淋巴细胞亚群，通过测定总T淋巴细胞（CD3+）、T辅助细胞（CD4+）、T抑制细胞（CD8+）以及CD4+/CD8+比值，来分析IM患儿的细胞免疫功能改变。

1.3治疗方法

IM干预组和IM对照组患儿在入院后均予以对症与支持治疗。IM干预治疗组加用匹多莫德口服液（DOPPELFARMACEUTICISRL，批准文号：H20090934）口服治疗，每日两次，一次0.4 g，共服两周。

1.4观察指标

观察两组IM患儿治疗前与健康儿童的CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值，以及这两组患儿在治疗两周后上述指标的变化；观察两组IM患儿退热时间、咽峡炎改善时间、颈淋巴结肿大恢复（直径缩小一半）时间和住院天数。

1.5统计学处理

采用SPSS19.0统计学软件分析，计量资料以均值±标准差（x±s）表示；采用方差分析与t检验，（表1组间采用LSD法进行两两比较；表2治疗前后比较用配对t检验），P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1T淋巴细胞亚群比较

两组IM患儿治疗前同健康组儿童比较，各种T淋巴细胞比例均有显著变化（P＜0.01），IM对照组与干预组患儿在治疗前CD3+、CD4+、CD8+与CD4+/CD8+比值无差异（P＞0.05），见表1；IM对照组患儿治疗前后的CD3+、CD4+、CD8+与CD4+/CD8+比值差异无统计学意义（P＞0.05），见表2；IM干预组患儿治疗后的CD3+、CD8+下降，CD4+与CD4+/CD8+比值升高，差异有统计学意义（P＜0.01），见表2。

表1　两组IM患儿治疗前与健康儿童的T淋巴细胞亚群监测结果比较（x±s）

表2　IM两组患儿治疗前后的T淋巴细胞亚群监测结果比较（x±s）

2.2临床恢复情况

与IM对照组相比，IM干预治疗组临床症状改善与体征缓解要快（P＜0.05），住院时间缩短（P＜0.01），见表3。

表3　两组临床症状、体征缓解时间及住院日比较（x±s，d）

2.3不良反应

所有患儿均未发现与药物相关的明显不良反应。

3　讨论

EBV属于疱疹病毒科γ亚科，在小儿感染中非常普遍。超过90%的儿童感染过EB病毒，亚洲儿童阳性率高于西方儿童。EB病毒感染人体，以B淋巴细胞作为靶细胞，B淋巴细胞受攻击后其抗原性发生改变，引发T淋巴细胞的防御性反应，并形成细胞毒效应，从而杀伤受到感染的B淋巴细胞。通常情况下，由受CD8+T细胞介导的强大免疫反应所控制[2]，EB病毒感染儿童可无明显症状。部分儿童可有发热、咽峡炎、肝脾肿大、淋巴结肿大或异常淋巴细胞增生等传染性单核细胞增多症的临床表现，严重的可因EB病毒感染T淋巴细胞或自然杀伤细胞（NK）的异常全身克隆扩增，出现慢性活动性EB病毒感染（CAEBV）、嗜血细胞增多症、多器官衰竭而危及生命。EB病毒感染导致细胞免疫功能损伤也是发生肿瘤（如Burkitt淋巴瘤、鼻咽癌、霍奇金淋巴瘤等）的重要原因。EB病毒的负荷量与IM疾病严重程度无相关性[3]。监测患儿的细胞免疫功能变化，对了解疾病的发展和预后有重要作用。

T淋巴细胞来源于骨髓中的多能干细胞，在胸腺内发育成熟，其后定居于淋巴结、脾脏与黏膜相关淋巴组织等周围免疫器官，发挥着细胞免疫及免疫调节等作用。CD4是辅助性T细胞（Th）的表面标志，具有辅助细胞免疫与体液免疫的作用；CD8则是细胞毒性T细胞（Tc）的表面标志，可直接杀伤靶细胞或是诱导靶细胞凋亡；而CD3则是所有T细胞的表面标志。T淋巴细胞亚群数量的稳定是维护人体的免疫功能的重要保障。EB病毒感染容易引起患者的免疫调节功能紊乱[4]。监测IM患儿T淋巴细胞亚群比例的变化，可以有效评价IM患儿的细胞免疫状态、以此来判定IM患儿的病情严重程度[5]。本研究中检测了EB病毒感染IM患儿急性期时淋巴细胞亚群的数量，在与健康儿童对照组进行比较时，发现IM患儿急性期CD3+、CD8+比健康儿童明显升高且有显著性差异（P＜0．01），CD4+、CD4+/CD8+比值较健康儿童明显降低且有显著性差异（P＜0．01）。可见EB病毒感染IM患儿是处于免疫抑制状态，与国内外较多文献相一致[6-8]，也为临床进行免疫调节治疗提供了理论依据。

匹多莫德是一种全新合成的二肽，化学名称：（R）-3-[（S）-（5-氧代-2-吡咯烷基]羰基]-四氢噻唑-4-羧酸，是目前唯一具有广泛生物活性的口服免疫促进剂。匹多莫德有益于人体免疫，具有促进先天性和适应性免疫反应增强的活性[9]。它能促进中性粒细胞与巨噬细胞的吞噬作用以及趋化和杀伤作用；又可促进淋巴细胞的增殖，尤其在免疫功能低下时促进降低的CD4+与CD8+比值回升至正常；同时能激发γ干扰素与IL-2的产生来促进细胞免疫反应。目前临床上较多用于反复呼吸道感染性疾病，促进机体的免疫调节并取得明显临床疗效[10，11]。鲜见有用于IM患儿，本次主要研究该药物对IM患儿的细胞免疫促进作用及临床症状的恢复情况。结果显示，匹多莫德在干预治疗IM两周以后，CD3+与CD8+T淋巴细胞比例显著下降，而CD4+T淋巴细胞数量与CD4+/CD8+比值显著上升，较治疗前的数据比较，差异有统计学意义（P＜0．01），而对照组同期变化不显著（P＞0．05）。匹多莫德治疗IM患儿在临床症状和体征恢复上同样有显著效果，匹多莫德治疗组比对照组退热时间、咽峡炎缓解时间、颈淋巴结缩小等症状和体征缓解快（P＜0．05），且住院日明显缩短（P＜0．01）。目前国内对于IM的治疗，临床上有用更昔洛韦、单磷酸阿糖腺苷等抗病毒治疗[12，13]或用中药治疗[14]，虽都取得一定疗效。但都缺乏大规模、多中心的RCT研究；且前者抗病毒药物的不良反应多种多样，多系统受累及[15]；中药抗EB病毒作用的靶点尚不清楚，以及对细胞免疫紊乱的调节作用尚不明确。而使用匹多莫德干预治疗，可有效改善IM患儿细胞免疫功能，并且有效缓解临床症状与体征变化，未见明显不良反应，治疗安全有效，可以作为IM的首选治疗用药之一[16-18]。当然本研究也有不足之处，未能做好长期的随访以及样本数不够大，还不能得出可以减少肿瘤发生的结论，有待继续研究。

[1]胡亚美，江载芳．诸福棠实用儿科学[M]．第7版．北京：人民卫生出版社，2002：821-825．

[2]Hatton OL1，Harris-Arnold A，Schaffert S，et al．The interplay between Epstein-Barr virus and B lymphocytes：implications for infection，immunity，and disease[J]．Immunol Res，2014，58（2-3）：268-276．

[3]John Odame，Joan Robinson，Nasser Khodai-Booran，et al．Correlates of illness severity in infectious mononucleosis[J]．Can J Infect Dis Med Microbiol，2014，25（5）：277-280．

[4]Hislop AD，Palendira U，Leese AM，et al．Impaired Epstein-Barr virus-specific CD8++T-cell functionin X-linked lymphoproliferative disease is restricted to SLAM family-positive b-cell targets[J]．Blood，2010，116（17）：3249-3257．

[5]刘永革，刘春燕.儿童传染性单核细胞增多症淋巴细胞亚群的变化及意义[J].内科，2011，6（3）：214-215.

[6]王慧燕，田可港，浮苗，等.传染性单核细胞增多症患儿血浆sHLA-G及外周血淋巴细胞亚群检测[J].中华医院感染学杂志，2012，22（5）：901-906.

[7]王强，王佐凤，曹玫，等.TLR2、TLR9及T细胞亚群在传染性单核细胞增多症患儿中的变化及意义[J].中国小儿血液与肿瘤杂志，2013，18（6）：267-271.

[8]Artur Sulika，Elzbieta Oldaka，Anna Krotena，et al．Epstein-Barr virus effect on frequency of functionally distinct T cell subsets in children with infectious mononucleosis[J]. Advances in Medical Sciences，2014，59（2）：227-231．

[9]Zuccotti GV，Mameli C.Pidotimod：The past and the present[J].Ital J Pediatr，2013，（39）：75.

[10]朱子东，王跃生，张敬，等.匹多莫德治疗支原体肺炎对T淋巴细胞功能的影响[J].中国实用医刊2014，41（2）：113-114.

[11]楚文英，王俊卿.匹多莫德口服液治疗小儿反复呼吸道感染临床疗效观察[J].中国现代医生，2014，52（13）：132-134.

[12]何英，孙广超.更昔洛韦治疗传染性单核细胞增多症有效性的Meta分析[J]．广州医学院学报，2008，36（5）：46-51．

[13]江山林.单磷酸阿糖腺苷治疗儿童传染性单核细胞增多症疗效分析[J].蚌埠医学院学报，2014，19（5）：619-621.

[14]甄小芳，幺远，秦丽娜，等.中药治疗小儿EB病毒感染疗效评价及免疫干预的研究[J].中国中西医结合杂志，2014，34（2）：167-173.

[15]方瑜.更昔洛韦治疗儿童传染性单核细胞增多症不良反应观察[J].中国基层医药，2012，9（8）：1233-1234.

[16]孙雨，王华，胡青华，等.不同年龄儿童传染性单核细胞增多症临床特征分析[J].临床误诊误治，2013，26（11）：65-68.

[17]王晋妮，雷中劲，张冷.儿童传染性单核细胞增多症82例诊治分析[J].医学综述，2009，15（15）：2362-2363.

[18]谢伦燕，石明芳.儿童传染性单核细胞增多症47例临床分析[J].临床和实验医学杂志，2009，8（11）：93，96.

Clinical efficacy of pidotimod in the treatment of infectious mononucleosis and its impact upon T-lymphocyte Subgroups

HUANG ZhengyongWU TiefengQIAN Cai

Department of Pediatrics，Wenzhou Chinese and Western Integrative Medicine Hospital（the Affiliated to Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine），Wenzhou325001，China

Objective To study the clinical efficacy of pidotimod in the treatment of infectious mononucleosis（IM）and its impact upon T-lymphocyte subgroups.Methods Flow cytometry was adopted to detect peripheral blood lymphocyte subgroups in 53 IM children patients and 20 healthy children.The 53 IM children patients were randomly divided into control group（n=25）and intervention therapy group（n=28）.Conventional therapy were performed in both groups，while intervention group+and CD8+lymphocyte were significantly elevated（P<0.01）in the IM children，while the level of CD4+lymphocyte and the CD4+/CD8+ratio decreased significantly（P<0.01）；（2）After pidotimod treatment for 2 weeks，ratios of both CD3+and CD8+lymphocyte were decreased，while the level of CD4+lymphocytes and CD4+/CD8+ratio increased obviously.The differences were statistically significant（P<0.01）；（3）The differences of the fever course，angina remission period，lymph node enlargement regression period and hospitalization days between two groups were all statistically significant（P<0.05）.Conclusion Pidotimod can improve the cellular immune function in IM children as well as holds a favorable clinical effects.

pidotimod-combined therapy additionally.Comparison was then carried out.Results（1）When compared with healthy children，the levels of CD3

Infectious mononucleosis；T-lymphocytes subgroups；Pidotimod

R725.1

A

1673-9701（2015）07-0004-04

浙江省医药卫生科技计划项目（2012KYB193）

（2014-11-21）