李巍

【摘 要】通过实验来比较水中细菌总数测定的三种培养方法，筛选出更灵敏的接种方法——双层培养法，该方法简便，实用性强，便于推广使用。

【关键词】水中细菌总数；测定；改进

0.前言

水是微生物广泛分布的天然环境，水中微生物种类及数量因水源不同而异。当水体受到污染时，水中微生物的数量可大量增加。但直接检查水中的各种病原微生物，方法较复杂，有的难度大。所以，在实际工作中经常以测定细菌总数来判断水的污染程度。细菌作为水体中主要的微生物类群，在表征水体污染程度等方面发挥着重要作用。但笔者发现测定细菌总数，在37℃培养24小时开始菌落计数，发现计数结果总是偏低。通过多次实验，认为从以下几方面加以改进，可以提高细菌检出率，减少不确定度。

1.材料与试剂

材料： 高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、恒温水浴箱、电热干燥箱、冰箱、灭菌三角瓶、灭菌的具塞三角瓶、灭菌平皿、灭菌吸管、调温电炉。

试剂：营养琼脂培养基、灭菌水。

2.原理

细菌总数测定是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异氧菌密度的方法。因为细菌能以单独个体、成双成对、链状、成簇等形式存在。本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数，通过计数在一定的培养基平板上生长的菌落数，来获得水中细菌的总数。细菌总数是指lmL或1g检样中所含细菌菌落的总数，它反应了水样中活菌的数量。

3.实驗方法

3.1水样的稀释

选择适宜的稀释度，以期在平皿上的菌落总数介于30～300之间。……