刘亚举，张俊涛，岳俊涛，郭利红 ，刘 海，张 毅，李效阳

（1.许昌市公安局刑事科学技术研究所，河南 许昌 461000；2.襄城县公安局刑侦大队，河南 襄城 461700；3.河南省公安厅刑事科学技术研究所，河南 郑州 450003）

插入/缺失（insertion/deletion，InDel）多态性是指基因组中插入或缺失不同大小的DNA片段所形成的多态性遗传标记[1]。InDel为一种特殊类型的二等位基因遗传标记，PCR产物能通过现有的毛细管电泳平台进行分型检测，容易获得较短的扩增片段，尤其适合高度降解的生物样本分型，突变率低，适合亲缘关系鉴定。

本研究采用Investigator®DIPplex荧光标记复合扩增系统对河南汉族人群30个InDel位点的遗传多态性进行调查，旨在为法医学应用提供基础数据。

1 材料与方法

1.1 材料

293例河南汉族无关个体血样取自实验室日常建库积累，其中男性206名，女性87名。采用sbeadex®法医学试剂盒（英国LGC公司）提取基因组DNA，参照Investigator DIPplex试剂盒（德国QIAGEN公司）说明书进行复合扩增。

1.2 方法

使用9700型PCR扩增仪（美国AB公司）。PCR扩增体系为 10μL，包括反应混合物A（Mg2+、dNTP和BSA） 2μL，引物 2μL，Taq2 DNA 聚合酶 0.25μL，纯水 4.75μL，模板 1μL。

扩增条件：94℃ 4min；94℃ 30s，61℃ 120s，72℃75s，30个循环；68℃ 60min；10℃保温。取 1μL扩增产物与DNA size standard 550（标记橙色荧光素BTO）0.5 μL和去离子甲酰胺10 μL混合，95℃变性3 min后，冰浴3 min，置3130型遗传分析仪（美国AB公司）上进行毛细管电泳，采用GeneMapper®ID-X软件进行等位基因分型。

InDel位点的等位基因频率（Fdel、Fins）、Hardy-Weinberg遗传平衡检验、同一染色体上InDel位点的连锁不平衡分析均采用SNP Analyzer 2.0[2]。采用Power-Marker®v3.25软件[3]计算各InDel位点的杂合度（H）、匹配概率（Pm）、个体识别率（DP）、二联体非父排除率（PEduo）、三联体非父排除率（PEtrio）和多态信息含量（PIC）。

2 结 果

2.1 30个InDel位点在河南汉族人群中的检测结果

30个InDel位点检测片段长度在70～205 bp，其扩增片段长度为76～158bp。……