辛华栋 张莉华 武艳霞 焦茹 吴士茜 袁艳龙

1邯郸市第一医院神经内科，河北邯郸056001

邯郸市中心医院2妇二科，3口腔外科，4体检中心，5病理科，河北邯郸056001

COX-2与淋巴结转移对宫颈癌预后影响的研究

辛华栋1张莉华2#武艳霞2焦茹3吴士茜4袁艳龙5

1邯郸市第一医院神经内科，河北邯郸056001

邯郸市中心医院2妇二科，3口腔外科，4体检中心，5病理科，河北邯郸056001

目的研究环氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）及淋巴结转移对宫颈癌预后的影响。方法采用免疫组化SP法，检测95例宫颈癌患者中COX-2的表达情况，并采用生存分析法评估COX-2表达与淋巴结转移对宫颈癌预后的影响。结果COX-2在95例宫颈癌中的阳性表达率为65.26%（62/95），COX-2的阳性表达与淋巴结转移、宫旁或脉管浸润呈正相关（r=0.220，P=0.032；r=0.215，P=0.037）。生存分析显示，COX-2阳性表达（P=0.005）、淋巴结转移（P=0.000）与宫颈癌患者的预后密切相关。结论COX-2及淋巴结转移是宫颈癌患者预后的独立影响因素，对判断预后及指导治疗具有重要的临床价值。

宫颈癌；环氧合酶-2；淋巴结转移；预后

Oncol prog,2015,13(4)

环氧合酶（cyclooxygenase，COX）是前列腺素合成过程中的限速酶，其亚型之一——COX-2在多种恶性肿瘤组织中的表达异常增高。另外，COX-2与肿瘤侵袭和转移的关系亦越来越受到关注[1]，但国内外对COX-2与宫颈癌预后相关性的报道却较为罕见。淋巴结转移是宫颈癌主要的转移途径之一，与肿瘤的远处转移及患者术后复发密切相关。本研究旨在探讨COX-2及淋巴结转移对宫颈癌患者预后的影响。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2008年6月至2009年10月住院治疗的宫颈癌患者95例，所有病例均经确诊且临床资料完整，无并发其他恶性肿瘤及心脑血管疾病。患者年龄为27～80岁，中位年龄42岁。按照2009年国际妇产科联盟（Federation International of Gynecology and Obstetrics，FIGO）宫颈癌临床分期标准诊断为Ⅰ期的患者有22例，Ⅱ期43例，Ⅲ～Ⅳ期30例。按照病理分型诊断为高、中、低分化者分别为16例、49例及30例。其中鳞癌77例，腺癌11例，腺棘细胞癌5例，小细胞未分化癌1例，透明细胞癌1例。所有病理结果均经两位资深病理科医生确诊。

1.2 研究方法

采用免疫组化SP法进行检测。羊抗人COX-2多克隆抗体、即用型羊SPkate检测试剂盒、DAB显色试剂盒、SP试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司。参照阳性细胞百分比及阳性细胞染色强弱进行免疫组化评分（immunohistochem ical scores，IHS）[2]：IHS=a×b（a，代表阳性细胞百分比：a=0，无阳性细胞；a=1，阳性细胞为1%～10%；a= 2，阳性细胞为11%～50%；a=3，阳性细胞为51%～80%；a=4，阳性细胞≥81%。b，代表阳性细胞染色强弱：b=0，阴性；b=1，弱阳性；b=2，中度阳性；b=3，强阳性）。IHS为0分计为阴性；≥1分计为阳性。以已知的COX-2表达阳性的肺癌切片作为对照。

1.3 随访

通过电话、门诊复查、书信等方式对患者进行随访，从确诊之日起至2014年10月结束随访，随访时间为8.6～76个月。95例宫颈癌患者失访3例，死亡26例，其中9例死于局部复发，8例死于远处转移，7例死于局部复发并发远处转移，1例死于心肌梗死，1例死于脑出血。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件进行分析。计数资料比较采用χ2检验；双变量相关分析采用Pearson相关检验；绘制生存曲线采用Kaplan-Meier法；两组间生存状况的比较采用Log-rank检验。

2 结果

2.1 COX-2在宫颈癌中的表达

COX-2阳性表达为胞质内可见棕黄色或棕褐色的颗粒。在95例原发宫颈癌患者中，COX-2表达阳性的患者为62例（65.26%）。在有无淋巴结转移患者中的阳性表达率分别为78.4%（29/37）及56.9%（33/58），差异有统计学意义（χ2=4.598，P= 0.032）。在有无宫旁或脉管浸润患者中的阳性表达率分别为81.5%（22/27）及58.8%（40/68），差异有统计学意义（χ2=4.377，P=0.036）。COX-2的阳性表达与淋巴结转移、宫旁或脉管浸润呈正相关（r=0.220，P=0.032；r=0.215，P=0.037）。（图1）

2.2 宫颈癌预后的单因素分析

COX-2表达阳性和阴性患者的生存状况见图2，COX-2阴性的宫颈癌患者5年生存率显著优于COX-2阳性的患者（P=0.005）；有无淋巴结转移患者的生存状况见图3，无淋巴结转移的宫颈癌患者5年生存率显著优于有淋巴结转移的患者（P= 0.000）。

3 讨论

图3 COX-2在宫颈癌中的表达

COX-2是花生四烯酸合成前列腺素的重要限速酶，在大多数组织中不表达或低表达，但在炎性介质、生长因子、促癌因素、内毒素、癌基因等作用下短时间内表达迅速增加，被称为诱导型即刻反应基因。COX-2通过促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、诱导新生肿瘤血管形成、介导细胞间黏附异常、降解细胞外基质、参与肿瘤免疫逃逸等机制增强肿瘤细胞浸润及转移等恶性潜能[3]，并影响患者的预后[4]。Saba等[5]对头颈部肿瘤的研究结果显示，COX-2的表达与总生存时间有关，COX-2高表达患者5年生存时间显著低于COX-2低表达者。在一项宫颈癌的多因素分析研究中显示[6]，COX-2、淋巴结转移、宫旁浸润或脉管瘤栓与预后显著相关；COX-2阳性组的宫颈癌患者3年生存时间明显短于阴性组患者。该结果与本研究的结果一致。本研究中COX-2阴性组的宫颈癌患者5年生存率显著优于COX-2阳性组，提示COX-2的表达与宫颈癌患者的预后密切相关。COX-2作为一项预后指标，对评估病情、指导治疗及监测预后发挥了积极的作用。本研究为COX-2分子靶向治疗提供了实验依据，已有学者对此进行了初步探讨[7]。

图2 COX-2表达阴性和阳性宫颈癌患者的生存曲线

图3 有无淋巴结转移宫颈癌患者的生存曲线

大量的文献表明[3-5]，肿瘤的局部浸润及淋巴结转移与患者的5年生存率密切相关。本研究的结果显示，淋巴结转移明显影响宫颈癌患者的的预后。张莉华等[6]和刘平等[8]进行宫颈癌Cox比例风险模型分析，结果支持以上观点，认为淋巴结转移是宫颈癌的独立预后因素。在恶性肿瘤组织中，因新生血管及淋巴管生长迅速、密集而紊乱，以及多种细胞因子及酶类表达异常，使细胞间接触抑制减弱、基底膜溶解或破坏而致新生淋巴管及血管管壁结构不完整，细胞间隙扩大，不能阻止癌细胞的侵入，从而促使癌细胞通过脉管系统向周围淋巴结及远处转移。在肿瘤组织切片中可见到未成熟的淋巴管内成簇的肿瘤细胞。本研究中有淋巴结转移的宫颈癌患者5年生存率显著低于无淋巴结转移的患者，再次证明了宫颈癌经淋巴结转移及脉管浸润的恶性生物学行为。

本研究显示，COX-2在有淋巴结转移组及有宫旁或脉管浸润组中的阳性表达率显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。COX-2分别与淋巴结转移及宫旁或脉管浸润进行相关性分析，结果均呈正相关（P＜0.05），由此推测COX-2、淋巴结转移、宫旁或脉管浸润在宫颈癌中可能通过某些机制协同发挥作用。在对卵巢癌、非小细胞肺癌及大肠癌的研究中亦显示COX-2与淋巴结转移密切相关[9-11]。血管内皮生长因子-C（vascular endothelial grow th factor C，VEGF-C）是重要的促淋巴管生长因子，VEGF-C mRNA是影响盆腔淋巴结转移的独立因素[12]。COX-2和VEGF-C的表达与多种肿瘤的发生呈正相关，也是和预后相关的独立因素[13-14]。本研究的结果表明，COX-2通过多种分子机制上调VEGF-C的表达，诱导实体瘤瘤内或肿瘤周围的淋巴管生成和扩张，促进恶性肿瘤的淋巴结转移。另有研究显示，COX-2通过多种分子途径诱导促血管生成因子表达上调，促使血管内皮细胞移位，并抑制血管内皮细胞凋亡，从而促进肿瘤细胞的浸润和转移[15]。本研究得出结论，COX-2、淋巴结转移及宫旁或脉管浸润在分子水平通过多因素、多途径、多步骤协同的机制发挥着复杂的作用，进一步增强了肿瘤细胞的侵袭性，对宫颈癌的预后具有重要的临床意义。

综上所述，COX-2的表达与淋巴结转移、宫旁或脉管浸润呈正相关，是宫颈癌的独立预后因素。在美国国家综合癌症网络（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）指南的临床分期中，淋巴结转移虽然对肿瘤分期无影响，但却是影响宫颈癌预后最显著的因素。在治疗前应进行MRI等辅助检查，全面评估患者的病情及淋巴结转移情况，并制订周密的治疗方案，手术宜彻底、规范地切除宫旁组织及淋巴结，确定个体化的放疗剂量及照射野，这些均有利于提高宫颈癌患者的生存率。COX-2与宫颈癌的浸润、转移及预后密切相关，可作为宫颈癌预后的监测指标之一，并可用于指导临床治疗。COX-2抑制剂作为宫颈癌治疗的新靶点，具有一定的应用前景，但还需要更多的体外试验及临床试验进一步论证其应用价值。

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Effectsof COX-2 and lymph-nodemetastasison prognosisof cervical cancer

XIN Hua-dong1ZHANG Li-hua2#WU Yan-xia2JIAO Ru3WU Shi-qian4YUAN Yan-long51Departmentof Neurology of Handan Municipal FirstHospital,Handan 056001,Hebei,China2Second Departmentof Gynecology,3Departmentof OralSurgery,4MedicalExam ination Center,5Departmentof Pathology of Handan MunicipalCentralHospital,Handan 056001,Hebei,China

Objective To study the effects of COX-2 and lymph-nodemetastasis on the prognosis of cervical cancer.MethodThe expression of COX-2 was identified by immunohistochemically S-PMethodin the paraffin sections,and survival analysis was applied to evaluated the effect of COX-2 expression and lymph-node metastasis on the prognosis of cervical cancer,while Kaplan-Meier plots provided.ResultThe positive expression rate of COX-2 was 65.26%(62/95)in 95 patients w ith cervical cancer,which was positively associated w ith lymph-nodemetastasis and latero-uterus or vessel infiltration(r=0.220,P=0.032;r=0.215,P=0.037,respectively).Survival analysis indicated that positive expression of COX-2 and lymph-nodemetastasis were both closely related w ith the prognosis of cervical cancer(P=0.005;P=0.000,respectively).ConclusionCOX-2 and lymph-node metastasis are independent prognosis factors in cervical cancer,whichmay serve as predictorsw ith clinical importance.

cervical cancer；COX-2；lymph-nodemetastasis；prognosis

R737.3

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2015.13.04.19

#通信作者（corresponding author），e-mail：drabing@163.com

2015-03-12）