（上海交通大学附属第一人民医院骨科 上海 200080）

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目的研究受体相互作用蛋白激酶1（receptor-interacting protein kinase 1，RIPK1）抑制糖皮质激素（glucocorticoid，GC）体外诱导的间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）的凋亡效果及其调控机制。方法将SD大鼠来源的MSC，分为3组：GC+MSC组，GC+RIPK1-MSC组和生理盐水+MSC组（对照组）。通过形态学观察、MTT分析、AO/EB染色、Hoechest 333342染色、Live/Dead染色、TUNEL凋亡检测及Western blot分析等方法确定抑制效果，并分析其中涉及的关键蛋白和信号通路。结果GC诱导24 h后，MSC发生凋亡，并证实RIPK1可对抗这种凋亡。RIPK1上调伴随TRAF2/cIAP1/c FLIPL水平升高，其为对抗凋亡的关键蛋白通路。结论 RIPK1可抑制GC诱导的MSC凋亡，为早期阻遏股骨头坏死（osteonecrosis of femoral head，ONFH）提供了新思路。

RIPK1； 细胞凋亡； 间充质干细胞； 细胞信号通路； 股骨头坏死

*This work was supported by the Youth Project of National Natural Foundation of China（8l20l439）and 20l4 Training Plan for Youth Doctor of Shanghai .

流行病学调查显示，目前股骨头坏死（osteonecrosis of femoral head，ONFH）居于髋关节疾病首位，至今无完善的解决方案。而糖皮质激素（glucocorticoid，GC）已成为非创伤性ONFH的首要危险因素［1］。GC所致ONFH广泛存在间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）和骨/成骨细胞凋亡、破骨细胞生存期延长和血管内皮细胞失调控，同时伴有血管内皮生长因子（vascular endothelial growth faetor，VEGF）分泌、骨成血管能力和强度下降以及骨间液丧失导致骨内分泌功能受损等［2-4］。有文献报道使用体外分离培养的自体骨髓间充质干细胞（bone marrow MSC，BMSC）（动物实验）和包含MSC的骨髓单个核细胞（临床研究）治疗早期ONFH。动物实验方面，Tang等［5］、Wen等［6］和Hang等［7］分别使用转染BMP、HGF和VEGF165的BMSC治疗动物ONFH，虽报道有效，但效果有限。临床研究方面，Hernigou等［8］、Gangji等［9］、Yan等［10］和Zhao等［11］相继采用自体骨髓单个核细胞直接移植治疗股骨头缺血性坏死，近期结果理想，远期病情仍有继续发展。……