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蒙药苏格木勒及其不同提取物对动物肾功能的保护作用△

2015-07-13陈红梅王秀兰苏都那布其乌恩奇

中国民族医药杂志 2015年7期
关键词:乌兰肾脏小鼠

陈红梅 王秀兰 翠 平 苏都那布其 乌恩奇

(1.内蒙古民族大学附属医院,内蒙古 通辽 028001;2.内蒙古民族大学蒙医药学院,内蒙古 通辽 028001;3. 内蒙古民族大学研究生 内蒙古 通辽 028000)

苏格木勒是蒙医临床上最常用蒙药之一,尤其作为“肾之好”在治疗肾脏疾病的复方制剂中出现频率最高。蒙药苏格木勒的种类很多,但临床常用的有查干苏格木勒、宝如苏格木勒、乌兰苏格木勒[1]。这3 种苏格木勒药味、药性、药能及药力有所不同,其临床适应症也有一定的差异[2]。查干苏格木勒、宝如苏格木虎治肾寒腰痛。乌兰苏格木勒主要用于治疗下寒,腰痛,尿频,遗精,肌肉拘痛等[3]。蒙医临床上,根据不同病情选用不同苏格木勒药材。关于3 种苏格木勒化学成分及药理作用方面有不少研究记载,但其肾功能保护作用的比较研究报道较少。为了回答3 种苏格木勒是否具有肾功能保护作用,三者之间是否存在差异等问题,进行了此项实验研究,结果报道如下。

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验仪器:BS-200 迈瑞全自动生化分析仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司);TG16-WS 台式高速离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司);YP1201N 电子天平(上海恒平科学仪器有限公司);HH-W600 数显三用恒温水箱(江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司)。

1.1.2 药品试剂:查干苏格木勒(120410649)、宝如苏格木勒(120410228)、乌兰苏格木勒(120419522)购自安国市祁瑞中药材有限责任公司,均已内蒙古民族大学蒙医药学院生药鉴定教研室鉴定;硫酸庆大霉素注射液(1210081)河南辅仁怀庆堂制药有限公司;甘油(20101025)天津光复科技发展有限公司;羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司);多聚甲醛(20100329)天津光复精细化工研究所;水合氯醛(20120414)天津市天力化学试剂有限公司;尿素氮试剂盒(201102)中生北控生物科技股份有限公司产品;肌酐试剂盒(201116)中生北控生物科技股份有限公司产品;

1.1.3 药品配制:取3 种苏格木勒的粉末用0.5%CMC-Na 溶液配成混悬液,水提取物用0.5%CMC-Na 溶液配制成提取物溶液,挥发油用加入食用橄榄油稀释备用。

1.1.4 实验动物:180 ~220g wistar(SPF 级)大鼠、20 ~22g 昆明种小鼠,由长春市亿斯实验动物技术有限责任公司提供,生产许可证号:SCXK(吉)2011-0004。

1.2 实验方法

1.2.1 庆大霉素致肾损伤实验[4]:取wistar 大鼠60(体重180 ~220g)只,按体重随机分为5 组,即空白组、模型组、查干苏格木勒组、宝如苏格木勒组、乌兰苏格木勒组等。空白组和模型组按体重(2mL/100g)灌胃给0.5%CMC-Na 溶液,3 种苏格木勒的给药组均按体重灌胃给药(2.57g/kg),共15d,模型组和给药组第5d 腹腔注射硫酸庆大霉素100mg/(kg.d-1),连续10d。末次给药后,称量每组大鼠体重、麻醉,从腹主动脉取血、分取血清、按照试剂盒说明测定血清尿素(BUN)、肌酐(Cre)等指标。同时取肾脏称重,计算肾脏指数。

1.2.2 甘油致肾损伤实验[4]:取wistar 大鼠60(180 ~220g)只,分组和给药方法同上,共给15d。给药第3d 和第13d 在24h 禁水之后除正常组外每只大鼠肌肉注射50%甘油10mL/kg 引起肾损伤。第二次注射甘油48h 后称重、麻醉、腹主动脉取血、分取血清、按照试剂盒说明测定血清尿素(BUN)、肌酐(Cre)等指标。同时取肾脏称重,计算肾脏指数。

1.2.3 小鼠游泳实验[5,6]:取昆明种小鼠40 只,体重18 ~22g,雌雄兼用,按体重随机分成4 组,即查干苏格木勒组、宝如苏格木勒组、乌兰苏格木勒组。按4.28g/(kg. d-1)剂量灌胃给相应蒙药0.5%CMC-Na 混悬液0.2mL/10g,空白组灌胃同体积0.5%CMC-Na 混悬液,共给药7d。末次给药30min 后,称小鼠体重并做好记录。使其尾部负5%体积量的硬币,在水深20cm、水温20℃的游泳箱中游泳,记录小鼠自开始游泳至死亡的时间。

1.2.4 小鼠耐缺氧实验[7,8]:取昆明种小鼠40 只,体重18~22g,雌雄兼用,分组和给药方法同上,共给药7d。末次给药30min 后,将小鼠放入预先加5g 钠石灰的250mL 磨口瓶中,密封瓶口,以存活时间为指标记录。

2 结果

2.1 苏格木勒粉末对肾损伤动物伤模型的影响

2.1.1 庆大霉素致肾损伤实验:结果表明,与正常组比较,模型组大鼠血清Cre、BUN 及肾脏指数明显升高;与模型组比较,查干苏格木勒组BUN 及肾脏指数明显降低,宝如苏格木勒组肾脏指数显著降低,乌兰苏格木勒组Cre、BUN 及肾脏指数均无显著差异,但均有降低趋势,见表1。

表1 苏格木勒粉末对GM 致肾损伤大鼠血清指标及肾脏指数的影响(±s)

表1 苏格木勒粉末对GM 致肾损伤大鼠血清指标及肾脏指数的影响(±s)

注:与正常组比较,※p <0.05,※※p <0.01;与模型组比较,△p <0.05。

组别 n 给药量(g/kg.d-1) Cre(μmol/L) BUN(mmol/L) ALB(g/L) 肾脏指数(%)96.1 ±16.7 8.97 ±1.96 31.7 ±1.84 0.79 ±0.06模型组 12 — 159 ±105※ 24.4 ±15.1※※ 29.0 ±7.10 1.27 ±0.16※※查干苏格木勒组 12 2.571 111 ±31.7 14.1 ±6.52△ 29.1 ±3.86 1.01 ±0.09△△宝如苏格木勒组 12 2.571 117 ±49.0 14.0 ±11.3 26.1 ± 2.29 1.07 ± 0.15△乌兰苏格木勒组 12 2.571 131 ±57.1 17.1 ±11.0 27.1 ±3.62 1.22 ±0正常组 12 —.23

2.1.2 甘油致肾损伤实验:结果表明,与正常组比较,模型组大鼠血清BUN 及肾脏指数明显升高;与模型组比较,查干苏格木勒和乌兰苏格木勒组BUN 明显降低,宝如苏格木勒组血清指标及各给药组肾脏指数均无显著差异,见表2。

表2 苏格木勒粉末对甘油致肾损伤大鼠血清指标及肾脏指数的影响(±s)

表2 苏格木勒粉末对甘油致肾损伤大鼠血清指标及肾脏指数的影响(±s)

注:与正常组比较,※※p <0.01;与模型组比较,△p <0.05,△△p <0.01。

组别 n 给药量(g/kg.d-1) Cre(μmol/L) BUN(mmol/L) ALB(g/L) 肾脏指数(%)58.9 ±6.44 8.58 ±0.96 29.0 ±2.08 0.78 ±0.07模型组 12 — 65.4 ±8.91 14.0 ±1.49※※ 28.1 ±2.11 1.05 ±0.22※※查干苏格木勒组 12 2.571 60.2 ±8.89 9.22 ±1.94△△ 27.7 ±2.40 1.14 ±0.20宝如苏格木勒组 12 2.571 74.7 ±22.9 12.6 ±4.13 28.5 ±1.83 1.35 ±0.48乌兰苏格木勒组 12 2.571 62.3 ±10.0 11.2 ±2.10△正常组 12 —27.8 ±1.47 1.29 ±0.29

2.2 苏格木勒水提取物对肾损伤动物伤模型的影响

2.2.1 庆大霉素致肾损伤实验:结果表明,与正常组比较,模型组血清Cre 和BUN 明显升高。与模型组比较,查干苏格木勒组血清ALB 明显降低,宝如苏格木勒组、乌兰苏格木勒组血清Cre、BUN 及ALB 均无显著性差异,见表3。

表3 苏格木勒水提物对GM 致肾损伤大鼠血清指标及肾脏指数的影响(±s)

表3 苏格木勒水提物对GM 致肾损伤大鼠血清指标及肾脏指数的影响(±s)

注:与正常组比较,※※p <0.01;与模型组比较,△△p <0.01。

组别 n 给药量(g/kg.d-1) Cre(μmol/L) BUN(mmol/L) ALB(g/L) 肾脏指数(%)69.9 ±12.3 8.06 ±1.65 25.0 ±2.70 0.73 ±0.04模型组 12 — 139 ±31.3※※ 19.3 ±9.49※※ 26.7 ±2.41 1.29 ±0.23※※查干苏格木勒组 12 0.439 127 ±33.4 19.6 ±8.19 23.2 ±2.65△△ 1.58 ±0.24△宝如苏格木勒组 12 0.653 150 ±43.6 19.0 ±11.2 27.2 ±2.27 1.19 ±0.19乌兰苏格木勒组 12 0.506 118 ±33.5 16.7 ±6.75 26.7 ±3.16 1.21 ±0正常组 12 —.13

2.2.2 甘油致肾损伤实验:与正常组比较,模型组血清Cre 和BUN 明显升高。与模型组比较,查干苏格木勒组血清BUN 明显降低;乌兰苏格木勒组Cre 显著升高;宝如苏格木勒组血清Cre、BUN 均无显著性差异,但均有降低趋势,见表4。

表4 苏格木勒水提物对甘油致肾损伤大鼠血清指标及肾脏指数的影响(±s)

表4 苏格木勒水提物对甘油致肾损伤大鼠血清指标及肾脏指数的影响(±s)

注:与正常组比较,※p <0.05、※※p <0.01;与模型组比较,△p <0.05、△△p <0.01。

组别 n 给药量(g/kg.d-1) Cre(μmol/L) BUN(mmol/L) ALB(g/L) 肾脏指数(%)69.9 ±12.3 8.06 ±1.65 25.0 ±2.70 0.73 ±0.04模 型 组 12 — 100 ±24.1※※ 12.4 ±4.76※ 22.5 ±1.96 1.80 ±0.35※※查干苏格木勒组 12 0.439 88.1 ±18.0 8.28 ±2.63△ 22.8 ±1.58 1.17 ±0.41△△宝如苏格木勒组 12 0.653 96.4 ±34.0 9.97 ±3.55 22.4 ±0.96 1.03 ±0.26△△乌兰苏格木勒组 12 0.506 139 ±22.7△△ 12.2 ±2.96 23.8 ±1.68 1.20 ±0.46正常组 12 —△△

2.3 苏格木勒挥发油对肾损伤动物伤模型的影响

2.3.1 庆大霉素致肾损伤实验:与正常组比较,模型组血清BUN 明显升高,ALB 明显降低,Cre 无显著性差异。与模型组比较,查干苏格木勒组血清BUN 明显降低,ALB 明显升高;宝如苏格木勒组和乌兰苏格木勒组血清ALB 均明显升高,Cre 和BUN 无显著性差异,见表5。

表5 苏格木勒挥发油对GM 致肾损伤大鼠血清指标及肾脏指数的影响(±s)

表5 苏格木勒挥发油对GM 致肾损伤大鼠血清指标及肾脏指数的影响(±s)

注:与正常组比较,※p <0.05、※※p <0.01;与模型组比较,△p <0.05、△△p <0.01。

组别 n 给药量(g/kg.d-1) Cre(μmol/L) BUN(mmol/L) ALB(g/L) 肾脏指数(%)94.3 ±13.4 7.06 ±1.63 27.8 ±3.00 0.65 ±0.08模 型 组 12 — 120 ±7.31 17.9 ±15.0※ 22.9 ±1.71※※ 1.04 ±0.14※※查干苏格木勒组 12 0.3 102 ±18.4 6.88 ±1.99△ 25.1 ±1.71△△ 0.77 ±0.05△△宝如苏格木勒组 12 0.1 135 ±69.2 21.8 ±14.0 25.3 ±1.16△△ 0.95 ±0.11△△乌兰苏格木勒组 12 0.2 125 ±42.7 10.1 ±2.80 29.6 ±3.67△△ 0.92 ±0.10正常组 12 —△△

2.3.2 甘油致肾损伤实验:与正常组比较,模型组血清BUN 明显升高,ALB 明显降低。与模型组比较,查干苏格木勒组血清BUN 均明显降低,ALB 明显升高;宝如苏格木勒组和乌兰苏格木勒组血清BUN 明显升高,Cre 无显著性差异,见表6。

表6 苏格木勒挥发油对甘油致肾损伤大鼠血清指标及肾脏指数的影响(±s)

表6 苏格木勒挥发油对甘油致肾损伤大鼠血清指标及肾脏指数的影响(±s)

注:与正常组比较,※p <0.05、※※p <0.01;与模型组比较,△p <0.05、△△p <0.01。

组别 n 给药量(g/kg.d-1) Cre(μmol/L) BUN(mmol/L) ALB(g/L) 肾脏指数(%)94.3 ±13.4 7.06 ±1.63 27.75 ±3.00 0.65 ±0.08模 型 组 12 — 83.0 ±13.9 12.5 ±3.91※※ 24.8 ±2.84※ 1.11 ±0.22※※查干苏格木勒组 12 0.3 94.3 ±12.1 6.42 ±1.29△△ 28.1 ±2.68△ 0.77 ±0.09△△宝如苏格木勒组 12 0.1 256. ±139 52.3 ±23.0△△ 27.2 ±3.52 1.24 ±0.17乌兰苏格木勒组 12 0.2 300 ±212 49.4 ±28.9△△ 25.8 ±6.85 1.32 ±0.26正常组 12 —△

2.4 游泳实验:与正常组比较,除了乌兰苏格木勒低剂量组,各给药组均明显延长小鼠游泳时间;查干苏格木勒及宝如苏格木勒低剂量组比相应的高剂量组更明显延长小鼠游泳时间。其中宝如苏格木勒低剂量组延长效果较突出。耐缺氧实验中,各给药组与空白对照组相比无统计学意义,见表7。

表7 蒙药苏格木勒对小鼠游泳时间及耐缺氧时间的影响(±s)

表7 蒙药苏格木勒对小鼠游泳时间及耐缺氧时间的影响(±s)

注;与正常组比较※p <0.05,※※p <0.01。

组 别 n 给药量(g/kg.d-1)游泳时间(min)耐缺氧时间(min 12.06 ±4.77 30.29 ±7.72查干苏格木勒组10 4.28 18.20 ±7.35※※ 29.92 ±4.84宝如苏格木勒组10 4.28 17.88 ±6.57※ 27.91 ±3.65乌兰苏格木勒组正常组 10 —10 4.28 12.62 ±5.35 28.28 ±5.74)

3 讨论

实验结果表明,蒙药3 种苏格木勒及其不同提取物对庆大霉素致肾损伤大鼠模型及甘油致肾损伤大鼠模型均有不同程度的肾功能保护作用。其中查干苏格木勒及其不同提取物的肾功能保护作用较突出。甘油致肾损伤实验中宝如苏格木勒挥发油和乌兰苏格木勒挥发油均明显提高血清BUN 水平,并乌兰苏格木勒水提取物明显提高Cre 水平,其原因有待进一步研究。小鼠游泳实验结果表明,查干苏格木勒、宝如苏格木勒可明显延长小鼠游泳时间。3 种苏格木勒肾功能保护作用机制需要进一步研究,尤其是查干苏格木勒的作用机制值得深入研究。

苏格木勒是蒙药中“肾之好”,其功能主治的现代医学内涵包括了治疗以肾脏为主的泌尿系疾病、神经系统疾病及消化系统疾病等更广泛的内容。因此,应结合蒙医基础理论,开展更深入广泛的实验研究,以逐步阐明其现代科学内涵。

[1]罗布桑. 蒙药学(蒙文)[M]. 北京:民族出版社,1986,139.

[2]内蒙卫生厅.内蒙古成药标准[M].呼和浩特:内蒙科学技术出版社,1984.

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[5]王宁元,刘斌钰,李丽芬,等. 枸杞子对小鼠寒冷耐缺氧耐疲劳的影响[J].齐齐哈尔医学院学报,2002,23(1):1-2.

[6]张庆华.蚕蛹蛋白缓解体力疲劳作用实验研究[J].四川大学学报,2007.

[7]谷琳娜.复方中药功能制剂对小鼠抗疲劳及耐缺氧作用的综合研究[J].吉林大学学报,2005.

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