武桂芝 段文婷 李秀梅 周雪梅 白音夫

(1.内蒙古自治区中医医院，内蒙古 呼和浩特 010020;2.内蒙古易和皮肤病医院，内蒙古 呼和浩特 010010;3.内蒙古药品食品监督所，内蒙古 呼和浩特 010055)

本品唇形科糙苏属植物糙苏Phlomis umbrosa Turcz.，以地上全草或根入药。夏秋采割地上全草，秋季挖取根部，去净泥土和杂质，晒干。系蒙古族习用药材，蒙药名渥古乐金-突来。本品甘，糙，温，平;止咳祛痰，祛风活络，消肿。用于感冒，慢性支气管炎，风湿关节痛，腰痛，跌打损伤，疮疖肿毒，是蒙医常用药［1］。目前尚无含量测定标准，本文依据糙苏成分建立该品的绿原酸含量测定方法。

1 仪器与试剂

高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)，TJ-912 型色谱分析平台(太极计算机公司)。绿原酸对照品(110753-200413)由中国药品生物制品检定所提供;乙腈为色谱纯;其他均为分析纯试剂;水为纯化水;糙苏采于呼和浩特市蛮汉山。

2 方法学考察

2.1 色谱条件：色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，色谱柱Kromasi-C18 (4.6mm×200mm，5μm)，流动相乙腈-水-磷酸(65：440：1)，流速1mL·min-1，柱温30℃，检测波长328nm，进样量10μL，理论板数按绿原酸峰≥5000。

2.2 测定溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，甲醇溶解，配制成1mL 含0.28 mg 绿原酸对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备：取糙苏，粉碎，过100 目筛，精密称定50mg，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，称重，超声处理30min ，放冷，称重，补足减失重量，滤过，摇匀，即得。

2.3 线性关系考察：取绿原酸对照品溶液0.25、0.5、1、2、3、4、5(mL)，分置10mL 量瓶内，甲醇稀释至刻度，分别精密吸取10μL 进样，按上述色谱条件测定。结果，绿原酸在7 ～140 μg·mL-1范围内呈良好的线性关系，回归方程A=5452 +7008C，r=0.999 。

2.4 精密度试验：取同一供试品溶液，在上述色谱条件下，连续进样6 次，测定绿原酸峰面积积分值，RSD 0.31%，精密度良好。

2.5 提取率的考察：供试品溶液行10、20、30、40 (min)的超声处理。20min 后绿原酸含量不再增加，确定30min 为最适合提取时间。

2.6 稳定性试验：取同一份供试品溶液，分别于0、2、6、8(h)进行测定，结果，绿原酸在8h 内的峰面积积分值基本稳定不变。

2.7 重复性试验：取同一批号供试品(叶子)6 份，各约50mg，精密称定，分别按上述拟定方法制备供试品及测定。样品平均含量0.21%，RSD 0.52%。

2.8 回收率试验：取上述含量的同批样品6 份，每份约60mg，置50 mL 量瓶中，依次精密加入分别加入0.1mL(每mL 含绿原酸5.41mg)对照品溶液，挥去溶剂，按供试品溶液的制备操作，测定含量，计算回收率。绿原酸平均回收率为101.1%，RSD 为0.88%

2.9 样品含量测定：取糙苏药材不同部位，按2.2.2 项下方法制备供试品溶液，按拟定的色谱条件测定绿原酸含量，根部0.11%，叶0.22%，茎枝0.08%，花0.51%，平均含量0.23%。

2.10 方法的专属性：在拟定的色谱条件下，分别取对照品溶液和供试品溶液进样测定，得到特征峰，与杂质分离良好，无干扰，见图。

图1 HPLC 图谱

3 结论

绿原酸是糙苏的主要活性成分，含量根部0.11%，叶0.22%，茎枝0.08%，花0.51%，平均含量0.23%。

方法学研究表明，HPLC 法测定糙苏绿原酸含量，测定方法稳定、重现性好，准确度高，色谱分离度好，无干扰。

［1］卫生部药典委员会. 卫生部药品标准蒙药分册［S］.1998：57.