李 瑛，张 腾，戴根来

(合肥久诺医药科技有限公司，安徽合肥 230088)

用于治疗高血压疾病的阿齐沙坦(azilsartan，图1)［1－2]是一代新型的选择性 AT1亚型血管紧张素II受体拮抗剂(ARBs)类抗高血压药［3－4]，由日本武田药品工业株式会社研究与开发，2012年1月开始在日本获批上市，片剂剂型。目前，我国尚未上市。阿齐沙坦属于低溶解性药物，难溶解于水中。中国药典2010版二部要求，难溶性的药物均需要作溶出度的检查，所以从质量控制上说，溶出度是其重要的一项指标。本文采用HPLC法，对三批自制阿齐沙坦片和一批市售片进行溶出度测定，并运用方法学进行考察［5－6]。

1 仪器与材料

1．1 仪器 美国科学系统公司SSI高效液相色谱仪(SSI Series 500 PUMP，Series 500紫外检测器，Anastar色谱工作站)、AB135－S分析天平(托利多梅特勒)、RCZ－8A智能药物溶出仪(天津市鑫洲科技有限公司)。

1．2 试药 阿齐沙坦对照品(合肥久诺医药科技有限公司，批号:D111001)，阿齐沙坦片，规格20 mg(合肥久诺医药科技有限公司，批号:120702、120703、120704;日本武田药品工业株式会社，批号:O002)，甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2．1 色谱条件与系统适应性 色谱柱:Agilent C18(250 mm ×4．6 mm，5．0 μm);流动相为水—乙腈—冰醋酸(43∶57∶1);检测波长为254 nm，柱温30℃，流速1．0 mL·min－1，进样量20 μL。按双酰化物峰计算理论板数应不低于3 000。

2．2 配制对照品溶液 取约20 mg阿齐沙坦对照品，精密称定，置100 mL量瓶中。加适量甲醇使其溶解，再加溶出介质(1．7 g磷酸氢二钾和4．475 g十二水磷酸氢二钠溶于1 000 mL水中)，稀释至刻度后摇匀。精密量取5 mL至50 mL量瓶中，加溶出介质，稀释至刻度，并作为对照品溶液使用。

2．3 配制供试品溶液 按照溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录X C第二法)，取阿齐沙坦片，以1 000 mL磷酸盐缓冲液(1．7 g磷酸氢二钾和4．475 g十二水磷酸氢二钠溶于1 000 mL水)为溶出介质，转速为50 r·min－1。45 min时，取适量溶液滤过(0．45μm微孔滤膜)。取续滤液作供试品溶液使用。

2．4 测试空白溶液 取溶出介质进样。结果表明空白溶液没有干扰［7]，如图2所示。

2．4．1 线性考察 取适量阿齐沙坦对照品，进行精密称定，加适量甲醇将其溶解，用溶出介质定量稀释成为每1 mL中约含0．35 mg的溶液，使其作为阿齐沙坦的对照品贮备液;分别精密量取1、2、3、4、5 mL贮备液至50 mL量瓶中，用溶出介质将其稀释至刻度后摇匀。分别量取20μL上述溶液，按“2．1”项条件测定，记录峰面积，以浓度C对阿齐沙坦峰面积A进行线性回归分析，有回归方程A=29 643C+12 312，r=0．999 7。结果显示，在 6．82 ～34．10 mg·L－1浓度范围内，阿齐沙坦具有良好的线性关系。

2．4．2 精密度试验 取20．46 mg·L－1上述对照品溶液，进行6次重复进样并进行测定，记录其峰面积。结果得出，RSD=0．71%。

2．4．3 稳定性试验 取20．46 mg·L－1上述对照品溶液，0、1、2、4、8 h 分别进行测定，记录其峰面积，结果得出，RSD=1．21%。结果表明，在8 h内阿齐沙坦溶液最为稳定。

2．4．4 重复性试验 取20片同一批样品(批号:120702)，精密称定后研细。精密称取6份适量(约相当于阿齐沙坦20 mg)，分别置于100 mL量瓶中，加适量甲醇，并运用超声处理使其溶解。使用溶出介质使其稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取5 mL续滤液，置于25 mL量瓶中，使用溶出介质稀释至刻度，摇匀。精密量取20μL，按照“2．1”项条件测定，记录其峰面积。另取适量阿齐沙坦对照品，精密称定，加适量甲醇将其溶解，再用溶出介质定量稀释成为每1 mL中约含20μg阿齐沙坦的溶液，作为对照品溶液，使用相同方法进行测定。结果得出，RSD=0．33%，说明该方法具有良好的重现性。

2．4．5 回收率试验 分别精密称取10、16、20 mg阿齐沙坦对照品及3份处方配比量的辅料，置于1 000 mL量瓶中，加溶出介质使其稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液使用;另取约20 mg阿齐沙坦对照品，精密称定，置于100 mL量瓶中，加适量甲醇将其溶解，另加pH 6．8磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀。精密量取5 mL，置于50 mL量瓶中，加溶出介质将其稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液使用。分别取对照品溶液和供试品溶液，按“2．1”项条件测定，并计算加样回收率，结果得出，平均回收率为(99．9±0．74)%，RSD 为0．74%，如表1 所示。

2．5 溶出度测定 按照溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录X C第二法)，取阿齐沙坦片，用1 000 mL pH 6．8磷酸盐缓冲液作为溶出介质，50 r·min－1转速。45 min时，取适量溶液后滤过，取续滤液作为供试品溶液使用。另取适量阿齐沙坦对照品，精密称定，加入甲醇适量将其溶解。将溶出介质定量稀释为每1 mL中约含20μg阿齐沙坦的溶液，作对照品溶液使用。分别量取对照品溶液与供试品溶液，按“2．1”项条件测定，计算溶出度，批号为 120702、120703、120704、0002 的样品溶出度分别为 99．4%、99．4%、99．8%、99．6%。

表1 阿齐沙坦回收率试验结果

3 讨论

本文使用HPLC法对阿齐沙坦片进行溶出度测定，具有良好的重现性、高度的准确性。以阿齐沙坦最大吸收波长254 nm为检测波长进行紫外检测，主峰保留时间为5 min以内，并具有良好的分离度。

阿齐沙坦难溶于水［8－9]，本文建立的 HPLC 法对阿齐沙坦片溶出度进行直接测定，可在同一色谱条件下与含量同时进行测定，准确简单，省时省力。

［1] 张亚安，傅志贤，张征林．抗高血压新药选择性AT1压型血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂－阿齐沙坦酯［J]．药学与临床研究，2011，19(3):262 －264．

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［7] Jie Z，Wenjuan P，Nan S，et aL．Separation of four-lol drugs by HPLCwith new bonded chiral stationary column［J]．Chinese Science Bulletin，2013，58(11):1267 －1273．

［8] 国家药典委员会．中国药典(二部)［S]．北京:中国医药科技出版社，2010:附录85 －87．

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