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药用植物琉璃苣根尖压片技术研究

2014-12-16周慧媛张红梅李思颖蔡宝宏杨文平

华北理工大学学报(医学版) 2014年1期

周慧媛 张红梅 李思颖 蔡宝宏 杨文平

(河北联合大学生命科学学院 河北唐山 063000;①唐山市第一中学)

琉璃苣(Borago officinalis L.)是紫草科一年生草本植物,原产于小亚细亚和地中海沿岸。该植物稍具黄瓜香味,全身披满白色绒毛,叶大,绿色椭圆形,叶缘有细齿,花蓝色或蓝紫色。果为小坚果,长5mm,具棱。此外,琉璃苣是欧洲人使用了700年的药草,拥有许多医学价值。植物染色体的研究对物种的变异、进化、遗传以及生活力过程平衡的控制都具有重要的作用。目前尚未有琉璃苣根尖压片技术、染色体数目、核型分析等细胞水平的相关报道。本研究以琉璃苣根尖为材料,探讨根尖压片法制备琉璃苣染色体的最佳条件,为琉璃苣细胞学特征、遗传机制、染色体核型分析的研究提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料 琉璃苣种子购于兴华专业花卉种子公司,经学院教研室的李超老师鉴定。

1.2 方法

1.2.1 取材。大解剖盘中平铺1cm左右的松针土,其上再撒上一层琉璃苣种子,而后种子上覆盖一薄层松针土。定时浇水,保持湿度,室温下培养萌发。培养1周后,选取长约1cm左右的根尖,取材时一般取包括根毛区在内的整个根尖。从上午8:00~16:00每隔半小时剪取根尖1次,每次约剪根尖20个左右。

1.2.2 预处理。剪好的根尖分别于0.5%、0.25%、0.1%、0.05%、0.01%秋水仙素中预处理。每种浓度分1、1.5、2、2.5、3、3.5、4h几个时间段,以其确定预处理的最佳条件。

1.2.3 固定。经预处理后的材料用蒸馏水冲洗干净,放入卡诺固定液(3甲醇:1冰醋酸)中固定2~4h。

1.2.4 解离。解离液为0.1mol/L的HCl。用蒸馏水将固定后的材料冲洗干净,放入解离液中解离。……

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