泪腺肿瘤组织中GPX3基因mRNA和蛋白的表达及其相关性
2014-11-13赵凯
眼科新进展 2014年10期
关键词:差异
赵凯
泪腺肿瘤是眼眶较为常见的肿瘤之一。泪腺肿瘤的发生发展与多种基因功能的改变密切相关,是一个复杂的多步骤的过程,包括癌基因的激活和抑癌基因的失活[1-3]。谷胱甘肽过氧化物酶3(glutathione peroxidase 3,GPX3)是GPXs家族中的成员之一,是近年来发现的具有抑癌作用的基因[4]。在人类的许多恶性肿瘤中低表达,而在泪腺肿瘤组织中,GPX3基因mRNA和蛋白的表达及其相关性的有关报道尚少[5-8]。本研究分别从mRNA及蛋白水平检测GPX3基因在32例泪腺多形性腺瘤、28例泪腺腺样囊性癌及9例正常泪腺组织中的表达,并探讨其表达和泪腺肿瘤发生发展的关系。
1 材料与方法
1.1 材料 本研究随机选取2011年1月至2014年2月郑州大学附属郑州中心医院眼科手术标本。根据患者的病理组织学检查结果,将所取标本进行分组。泪腺良性肿瘤组患者的标本32例,为泪腺多形性腺瘤;泪腺恶性肿瘤组患者的标本28例,为泪腺腺样囊性癌;开放性眼眶损伤患者所切除的损伤部位泪腺共9例,为正常泪腺组织组。其中男33例,女36例,年龄21~77岁,中位年龄 49岁。所有病例术前均未接受化学治疗、放射治疗。所取标本即刻用液氮冻存并在-80℃条件下保存。
1.2 主要试剂 RNA试剂及RT-PCR反应试剂盒购自大连TakaRa生物技术公司。抗GPX3兔抗人单克隆抗体购自美国Santa Cruz公司。辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔二抗购自北京中杉金桥生物技术有限公司。鼠抗人内参β-actin一抗购自北京康为世纪公司。
1.3 RT-PCR检测 GPX3的 mRNA表达 取50 mg组织应用 Trizol法提取组织中的 RNA,经 Nanodrop分光光度计检测其纯度和浓度。……
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