卢文朋，栗世方

0 引 言

在进行脑组织病理学实验研究中，为避免组织细胞在自身溶酶体酶的作用下溶解破坏，尽量保持其抗原性，故动物处死前需行灌注固定处理。其目的就是快速、均匀地保存标本，以保持标本类似活体状态［1］。在以往的操作基础上，对大脑灌注固定技术做了进一步改进，并对操作过程中存在的问题，提出相应措施。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 器械与试剂 止血钳2把，组织剪、眼科剪各1把，皮镊1把，输液管2副(输液器针头的针尖掐断，钝圆即可)，等渗盐水250 mL、4%多聚甲醛150 mL;小鼠抗 Neun单克隆抗体(Abcam公司，USA)、FITC标记的驴抗小鼠二抗(jackson公司，USA)。

1.1.2 实验动物 健康成年 SD大鼠20只，8周龄，雄性，280～300 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号:SCXK(京)2012-0001，饲养环境(22±2)℃，常规饲料喂养，自由饮水。实验过程中对动物的处置符合医学伦理学标准。

1.2 方法步骤 ①将分别装有等渗盐水和4%多聚甲醛的输液瓶悬吊于距离操作台1.5 m高的位置［2－3］。② 麻醉显效的大鼠仰卧于操作台上，固定四肢及头部，沿腹中线自剑突剪开皮肤，至下颌部，充分分离皮肤与皮下组织，暴露两侧胸廓。③游离胸前壁:止血钳夹起胸骨剑突，在膈肌上方，循外上方向，剪开双侧胸廓至胸骨上部［1］，小心分离心包膜与胸骨间的系膜，将已游离的胸廓提起、固定。此时，胸腔可充分暴露，心脏及主动脉弓清晰可见(若主动脉弓被胸腺遮掩，可适当分离)。④夹闭胸主动脉:用皮镊提起左侧肺，可见其下位于大鼠脊柱左侧的胸主动脉(胸主动脉右侧为食管)，以止血钳夹闭胸主动脉。……