王一帆 程明亮 吴君

目前动物实验和人群流行病学调查表明砷对肝脏有致损伤作用，可引起多种肝脏疾病（肝纤维化、肝硬化及肝癌）[1-2]。且临床观察汉丹肝乐对砷中毒致肝损伤有保护作用，初步显示较好疗效[3]。本实验研究汉丹肝乐对砷暴露大鼠肝损伤的保护作用，了解其可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料 实验动物为SD大鼠80只，雌雄各半，体重（180～200）g，由贵阳医学院实验动物中心提供。SD大鼠随机分成正常组、模型组、汉丹肝乐高、低剂量预防组，每组各20只。

试剂采用汉丹肝乐（主要成分丹参、赤芍、黄芪、汉防己碱、银杏叶等），棕黄色粉末，贵阳制药厂生产。亚砷酸钠，分析纯，美国sigma公司产品。丙二醛测定试剂盒、超氧化物歧化酶测定试剂盒、Trizol试剂均购于南京建成生物工程研究所。MT引物由上海生工生物工程有限公司合成。β-actin引物、逆转录cDNA第一链合成试剂盒、POWER SYBR Green PCR MASTER MIX由美国国家环境卫生科学研究所刘杰博士惠赠。甲醛、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠等均为市售分析纯。实验器材采用GeneAmp9700扩增仪、GeneAmp5700实时荧光定量基因扩增仪、Amersham Biosciences 2100核酸蛋白分析仪、SIGMA-3K30台式冷冻离心机、上海菁华科技仪器有限公司752紫外可见分光光度计、日本三洋-80℃低温冰箱、水浴箱、低速离心机、微波炉等。

1.2 方法 正常组大鼠饮用自来水，模型组、汉丹肝乐高、低剂量预防组饮用亚砷酸钠水，食用普通饲料。亚砷酸钠水浓度，在实验前根据给药方式、大鼠耐受情况，用不同浓度给大鼠饮用，最后选定100/L作为实验浓度。同时，用汉丹肝乐悬液给预防组大鼠灌胃，1次/d，高剂量预防组1g/kg体重、低剂量预防组0.5 g/kg体重。……