全碧波 张善锋 李月白 李晓坤 李啸然 李 洁

(郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室，河南 郑州 450001)

骨肉瘤是骨组织最常见的原发性恶性肿瘤，约占所有骨肿瘤的20%。典型的恶性骨肉瘤具有显著地局部侵袭性和早期迁徙能力〔1〕，由于其转移病症较难诊断，通常该病患死亡率较高。过氧化物酶体增殖因子活化受体(PPAR)γ的激动剂能诱导多种肿瘤细胞凋亡或分化，其作为人类癌症的化学预防剂的潜在用途是目前研究的热点〔2〕。本研究分析PPARγ激动剂15-脱氧前列素2(15d-PGJ2)对人骨肉瘤MG63细胞增殖和凋亡的影响，探讨其抗肿瘤的作用机制。

1 材料和方法

1.1材料 人骨肉瘤细胞株MG63(北京协和细胞资源中心)；15d-PGJ2(美国Cayman公司)；胎牛血清(PAA公司)；胰蛋白酶(美国Gibco公司)；MTT、DMSO(美国Sigma公司)； RPMI 1640培养液(北京索莱宝科技有限公司)；DEPC(加拿大Fermentas公司)；AnnexinV-FITC试剂盒(南京凯基公司)；PCR扩增试剂盒 (加拿大Fermentas公司)；SP法免疫组化染色试剂盒(北京中杉金桥)；其余试剂均为国产分析纯。

1.2细胞培养 常规细胞复苏、换液和传代，倒置相差显微镜观察骨肉瘤MG63细胞的生长情况及形态学特征，取生长状态良好的骨肉瘤细胞描记细胞生长曲线。

1.3实验分组 以人骨肉瘤MG63细胞为作用对象，分为：对照组，不添加任何药物；15d-PGJ2组，根据实验加入其终浓度分别为0.1、1、5、10、20、50 μmol/L的15d-PGJ2。

1.4MTT法检测细胞增殖活力 取对数生长期MG63细胞，以3×104/ml细胞浓度，接种96孔培养板，每孔200 μl，细胞贴壁后弃去培养液，加入不同浓度的15d-PGJ2，对照组不加药，每组设6个复孔，空白对照组加入等量溶剂。分别孵育24 h、48 h、72 h及96 h，每孔加入MTT液20 μl(5 g/L)，4 h后弃去上清液，并加入DMSO 150 μl，终止反应。……