韩金荣 罗 强 刘 华 孙 黎 张林西

(河北北方学院生命科学研究中心，河北 张家口 075000)

姜黄素的多种药理活性与其抗氧化、抗炎作用有关〔1〕。目前已有实验证实姜黄素对多种肿瘤细胞具有抑制生长和诱导凋亡的作用，其抗肿瘤机制各不相同〔2〕。奥沙利铂(L-OHP)为第三代铂类化合物，是消化系统肿瘤化疗方案中的常用药物。本研究旨在探讨姜黄素联合L-OHP对L-OHP杀伤胃癌细胞的作用及其可能机制。

1 材料与方法

1.1材料 姜黄素购于天津市科密欧化学试剂有限公司；奥沙利铂由江苏恒瑞医药股份有限公司出品；Caspase-3活性检测试剂盒、CCK-8试剂盒、Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒、FITC标记山羊抗兔二抗购自碧云天生物技术研究所；兔抗人FAS一抗购于北京中杉金桥生物技术有限公司；人胃癌BGC-823细胞为河北北方学院生命科学研究中心保存。

1.2方法

1.2.1细胞培养 将BGC-823细胞接种于培养瓶中，用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基，37℃、5%CO2条件下培养。取对数生长期细胞用于本实验。

1.2.2细胞生长抑制试验(CCK-8法) 取5×104/ml 的细胞悬液接种于96孔板中，按阴性对照组、姜黄素组、奥沙利铂组、联合作用组，分别来加药物。每个组的浓度设4个复孔。培养箱中再孵育24 h后，每孔加入20 μl CCK-8 溶液，继续孵育4 h，酶标仪检测各孔在490 nm处的光吸收值(A490值)，按照公式计算抑制率。

1.2.3流式细胞术检测细胞凋亡率 收集对数生长期细胞，离心计数，调整细胞浓度为5×105/ml，每孔2 ml接种于6孔板中，培养24 h后加入药物。阴性对照组加入完全培养基2 000 μl，姜黄素组终浓度20 μmol/L，奥沙利铂组终浓度为10 μmol/L，联合作用组姜黄素和奥沙利铂的浓度分别为20、10 μmol/L，设3个复孔。……