王敏娟 李亚军 张 蓓 石少亭 郭长江 折 潇 张世俊 左 星

(西安医学院第一附属医院神经内科，陕西 西安 710077)

阿尔茨海默病(AD)病理变化之一是淀粉样蛋白前体(APP)裂解成的β淀粉样蛋白沉积脑内所形成的老年斑及神经元纤维缠结。AD的发病机制非常复杂，氧化应激被认为是AD的一个重要致病因素，有研究表明，由异常沉积Aβ诱导的氧化应激导致的神经元代谢障碍和突触功能丧失在AD发病中处于关键地位〔1，2〕。增强其抗氧化能力变成了近年来AD治疗的一个靶点。脑内主要的抗氧化含硒酶是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)，GSH-Px通过活性中心的硒代半胱氨酸与氧代谢产物发生接触反应，发挥其抗氧化功能，研究表明硒能够增强GSH-Px的抗氧化活性。本研究观察亚硒酸钠预处理对Aβ氧化损伤PC12细胞的影响。

1 材料与方法

1.1材料 PC12细胞株、亚硒酸钠(购自西安交通大学医学院中心实验室)；Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM美国Gibco公司)；胰蛋白酶(美国Gibco公司)；小牛血清(杭州四季青公司)；四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Aβ1～40；二甲基亚砜(DMSO美国Sigma公司)。LDH、GSH-Px、丙二醛(MDA)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)；碘化丙啶(PI)、FITC-Annexin V(美国Sigma公司)；其余试剂为国产分析纯试剂。

1.2主要仪器设备 Thermo Forma CO2培养箱(美国Thermo Fisher Scientific)；POLARstar OPTIMA酶标仪(德国BMGLABTECH实验仪器公司)；倒置显微镜(日本Olympus公司)；超净工作台(天津泰斯特仪器有限公司)；流式细胞仪(美国Becton Dickinson公司)。

1.3方法

1.3.1细胞培养 PC12细胞用含10%的小牛血清的DMEM培养基(100 mg/L链霉素，100 mg/L青霉素)在37℃、5%的CO2及饱和湿度的培养箱中培养，每2～3天换液一次，5～6 d传代一次。

1.3.2MTT法检测亚硒酸钠对PC12细胞活……