张林会 李胜超 孙国柱

(河北医科大学第二医院神经外科，河北 石家庄 050000)

颅脑损伤包括机械性冲击造成的原发性损伤和损伤后启动的一系列生化过程引起的继发性、进行性神经细胞损伤即继发性脑损伤，前者具有不可预料性和难控制性，后者则是在首次损伤后启动的包括一系列神经生化降解过程的损伤级联反应〔1〕，炎性细胞因子大量激活并分泌，导致神经细胞变性、坏死，与颅脑损伤的过程及其预后密切相关〔2〕，但有关炎性细胞因子表达规律的报道较少。为此，本研究通过制作液压打击颅脑损伤模型，观察脑组织含水量、组织学变化以及炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、ICAM-1表达的动态变化，探讨炎性细胞因子在继发脑损伤中的作用。

1 材料与方法

1.1材料 成年雄性SD大鼠48只，体重250～300 g，购于河北医科大学实验动物中心，兔抗鼠IL-1β、IL-6、TNF-α、ICAM-1多克隆抗体购于Sigma公司，兔二步法检测试剂盒购于Santa Cruz公司，其他试剂均为进口或国产分析纯。

1.2动物分组和模型制作 将实验动物随机分为2组，其中模型组40只，再按照伤后1、6、12、24 h、3、7 d又分为5个亚组，每个亚组8只；假手术组共8只。采用Dixon法制作动物模型〔3〕。假手术组，仅切开头皮，凿骨窗，不行液压打击，余同上。喂养标准饲料和饮用纯净水，使用动物专用笼箱和洁净垫料，恒温20～25℃饲养。自由进食水。

1.3标本的制作和采集 假手术组在术后，模型各亚组在相应时间点，在氯胺酮过度麻醉下，4%多聚甲醛经心灌注,开颅取脑，以经过挫伤灶的横线为基线，在基线前侧取(200±50) mg脑组织用于测定脑组织含水量，取挫伤灶后(断面跨挫伤灶)约4 mm厚的脑组织进行固定和石蜡包埋，获得的组织切片行HE染色和免疫组织化学染色。……