急进高原大鼠肺泡Ⅱ型细胞肺水转运功能与肺损伤的关系
2014-08-30王海燕赵海龙董红梅
吴 岳 王海燕 张 伟 赵海龙 董红梅 王 静
肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)占肺泡上皮的60%,对肺泡正常结构和功能的维持具有非常重要的作用。已有研究提示,ATⅡ是肺泡上皮细胞的祖细胞,也是肺泡上皮的干细胞[1]。在细胞的更新及损伤的修复过程中,ATⅡ既可以分化成Ⅰ型细胞,还可通过进行有丝分裂来补充自身数量。相关研究表明,ATⅡ细胞上存在钠水通道,它与肺泡内液体的产生和清除关系密切,在肺水的清除中起着维持细胞内外液体平衡的作用[2]。但ATⅡ与高原低氧肺损伤关系的研究少见。为此,我们观察了急进高原不同时间大鼠肺脏的细胞学形态和超微结构变化,并测定了肺泡液体清除率(alveolar liquid clearance, ALC),旨在探讨ATⅡ肺水转运功能与高原肺损伤的关系。
材料与方法
一、实验材料
从西安(海拔400 m)购买Wistar雄性大鼠60只,体重210~230 g,随机分为4组,每组15只。对照组(T0组)在平原(海拔400 m)进行实验检测,另外3组在10 h内快速运送到海拔4300 m的青海省玛多县,分别于急进高原24 h(T1组)、72 h(T2组)、168 h(T3组)进行实验。
二、研究方法
1. 气管插管和颈动脉插管:检测前1 h用3%戊巴比妥钠(150 mg/kg)腹腔内注射麻醉。麻醉后进行气管切开插管,采用小动物呼吸机(Model 683)行呼吸末正压通气(PEEP为2.20 mmHg),吸氧浓度1.0,呼吸频率60次/min,潮气量10 ml/ka,气道压低于11.0 mmHg。右侧颈动脉行PE50导管插管,用血流动力学检测仪(CARDIOMAX-Ⅱ)监测血压。术后静置1 h,并且把心率维持在300次/min以下。
2.灌注液的配置:按文献方法配置5%小牛血清、乳酸钠林格氏液加伊文思蓝(1 g/L)和I125-白蛋白灌注液[3]。移去呼吸机接头,用5 ml注射器将灌注液10 ml/kg[每只鼠按74kBq(1Ci=3.7×107kBq)]和0.5 ml空气注入大鼠肺内,连接呼吸机,继续通气。……
