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卡介苗对支气管哮喘大鼠气道炎症的预防治疗作用及机制研究

2014-08-30刘晨涛薄建萍董艳婷田新瑞

中华肺部疾病杂志(电子版) 2014年3期

刘晨涛 薄建萍 加 慧 董艳婷 田新瑞

支气管哮喘(bronchial asthma,简称哮喘),是由多种细胞及细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病,以气道的高反应性(airway hyperreactivity, AHR)和气道炎症为重要特征。在气道炎症发生机制中,上皮细胞损伤、间质增生发挥主要作用。本研究通过复制哮喘大鼠气道炎症模型,给予地塞米松、接种卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin, BCG)及BCG治疗干预,观察肺泡灌洗液(bronehoalveolar lavage fluid, BALF)细胞及嗜酸性粒细胞总数、上皮间质标志物变化,探讨气道上皮细胞的损伤和间质改变在哮喘气道炎症发病机制中的作用及BCG对支气管哮喘气道炎症的预防治疗作用及机制。

材料与方法

一、实验材料

选择SPF级Wistar雄性大鼠40只,2~3个月龄,体质量160~180 g(由山西医科大学实验动物中心提供),随机分为5组,每组8只动物。卵白蛋白(ovalbumin, OVA)(由美国sigma公司生产);氢氧化铝(aluminumhydroxide, Al(OH)3)(由天津化学试剂三厂生产),彩云JWC-201D型雾化器(由鞍山市同信医用仪器厂生产);地塞米松磷酸钠注射液5 mg/1 ml/支(山东新华制药股份有限公司);BCG 0.5 mg/支(成都生物制品研究所有限责任公司);TGF-β1 ELISA试剂盒(武汉博士德生物公司);E-cadherin 、Fibronectin、α-SMA小鼠抗大鼠一抗(SantaCruz公司),FITC标志的羊抗小鼠IgG(武汉博士德生物工程有限公司),SABC抗鼠试剂盒及DAB显色剂(武汉博士德生物公司)。

二、实验方法

1. 实验分组: 取40只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为对照组、哮喘组、BCG治疗组、地塞米松治疗组、BCG接种组;哮喘组、BCG治疗组、地塞米松治疗组均于实验第1、8天对大鼠腹腔注射OVA 100 mg和氢氧化铝100 mg混悬液1 ml进行致敏,第15天开始每日激发前30 min分别给予腹腔注射蒸馏水0.16 ml、皮内注射BCG 0.025 mg、腹腔注射地塞米松0.25 mg/kg,并将大鼠置于自制的密闭雾化吸入箱内,予1% OVA蒸馏水30 ml雾化吸入30 min,1次/d,共2周。……

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