童春堂 尤兰华 郭沛艳 李雪辉 陈杭薇

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种常见的危害人类健康的慢性呼吸系统疾病，严重影响患者的生活质量，随着人口老龄化及环境污染的加重，其患病率呈逐年增高[1]。COPD患者每次病情的急性加重严重都会损害肺功能，加速病情进展，因而减少COPD急性加重成为延缓该病病情进展、改善生活质量的重要措施。既往研究发现大约50%的AECOPD和细菌感染有关，而AECOPD与呼吸道病毒及非典型病原体感染的关系报道较少[2]。本研究应间接免疫荧光法(immunofluorescence assay,IFA)快速定性检测AECOPD患者血清中九种呼吸道病原体IgM抗体，旨在了解其在AECOPD患者中的感染情况，现报道如下。

对象与方法

一、检测对象

2012年6月1日至2013年9月1日收住北京军区总医院呼吸内科的211例AECOPD患者，诊断标准符合2011年修订版GOLD指南[2]，排除近期接种流感疫苗患者。其中男性128例，女性83例，年龄46～98(77.4±9.4)岁，临床症状包括咳嗽、咳黄痰、喘憋加重等,其中发热患者18例 (体温>37.5 ℃)，记录其入院季节、年患病次数等。

二、检测试剂

九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒(国食药监械(进)字2010第3400365号)为西班牙VIRCELL公司原装进口产品。采用间接免疫荧光法(IFA)技术，可同时检测流感病毒A/B(influenza virus A/B,FluA/B)、副流感病毒(parainfluenza virus,PIV)1/2/3型、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)、腺病毒(adenovirus,ADV)、嗜肺军团菌(Legionellapneumophila,LP)血清1型、肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)、Q热立克次体(Q fever rickettsia,QFR)、肺炎衣原体(chlamydia pneumonia,CP)九种IgM抗体。

三、检测方法

1. 标本收集与处理：①患者入院24 h内，静脉穿刺采集血液2～3 ml，以离心半径8 cm，2000 r/min离心5 min后取血清待测，按照1︰1比例稀释血清样本；②向稀释后的血清加入吸附剂以避免干扰IgM检测，处理后的血清以离心半径8 cm，3000 r/min离心10～15 min，在载玻片的每孔中加入15 μl吸附剂处理过的血清，放入湿盒于37 ℃下温育90 min；③……