西兰花多肽组分II诱导神经胶质瘤细胞凋亡的作用及其机制研究*
2014-08-09徐俊杰赵东海纪朋艳王玮瑶吕士杰
齐 玲, 徐俊杰, 赵东海, 韩 磊, 纪朋艳, 王玮瑶, 吕士杰
(吉林医药学院,吉林 吉林132013)
多肽是由10~100个氨基酸分子经脱水缩合而成的化合物,它在生物界中的存在十分广泛。多肽除了具有营养、调节机体的代谢和生理功能外[1-2],还可以作为药物来发挥作用。多肽药物具有活性高、用量小和易产业化等优点,现已成为药物研发的热点之一。西兰花是具有明确抗癌特性的食物,它因含有多种营养成分而被称为“营养素的宝库”。研究表明,西兰花中的维生素、多酚类和黄酮类物质具有明确的抗氧化活性,硫代葡萄糖苷则能降低癌症的患病风险[3-4],而硫苷的水解产物异硫氰酸盐具有明确的抗癌作用[5],但关于西兰花多肽成分抗癌的研究较少。本实验在以往工作的基础上,将西兰花多肽提取物经凝胶过滤层析分离获得4个主要洗脱峰,取其中第II峰即西兰花多肽组分II(CII)多肽含量最高的洗脱物用于后续实验研究[6]。本实验进一步研究西兰花中多肽组分II对神经胶质瘤的作用及可能的机制。
材 料 和 方 法
1 材料
1.1细胞株 人神经胶质瘤SHG-44细胞株,由吉林大学基础医学院提供。
1.2主要试剂 RPMI-1640细胞培养基 (HyClone);0.25%胰蛋白酶和小牛血清(Gibco);四甲基偶氮唑(MTT)和二甲基亚砜(DMSO)(Sigma);西兰花多肽组分II(冻干粉,吉林医药学院制备);免疫组化试剂盒(北京中杉公司);β-actin、Bax、Bcl-2和caspase-3 抗体(Santa Cruz)。
1.3主要仪器 CB150型CO2培养箱(Binder);J-26XP型超低温高速离心机(贝克曼);MDF-U53V型超低温冰箱(三洋);PLUS 384型全自动酶标仪(MDC);IX-70型倒置显微镜(Olympus);DNA蛋白电泳系统(Bio-Rad);Image-Pro Plus 图像分析管理系统 (Media Cybernetics)。……
