怀佳萍 孙学成 叶晓华 徐晓 吴建胜

在重症急性胰腺炎(SAP)引起的多器官功能衰竭中，呼吸功能衰竭占SAP第1周病死率60%[1]，肺功能障碍是除腹部脏器功能障碍外最突出的表现[2]，因此同时着眼于胰腺和肺组织是治疗SAP的新策略。Th22细胞是不同于其他任何一种类型的效应T细胞的亚型，能分泌细胞因子IL-22、IL-26和IL-13等[3-4]。IL-22能减轻组织损伤，加快组织修复，维持组织完整性，加强免疫功能及增强抗菌作用[5]。褪黑素(melatonin, MT)是由哺乳动物和人类的松果体产生的一种胺类激素，具有调节生殖系统、免疫系统及抗氧化、抗毒性、抗肿瘤等重要作用。本研究应用MT干预急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠，观察其对ANP相关性肺损伤的保护作用，探讨可能的作用机制。

一、材料和方法

1．实验动物及分组：72只健康雄性SD大鼠，清洁级，体质量200～250 g，由温州医学院实验动物中心提供。术前禁食12 h，自由饮水。按完全随机法分为假手术组(对照组)、ANP组和MT干预组(MT组)，每组24只。采用胰胆管逆行注射4%的牛磺胆酸钠(Sigma公司)1 ml/kg体质量的方法制备ANP模型。MT组术前30 min腹腔注射褪黑素(Sigma公司)50 mg/kg体质量。对照组仅打开腹腔，翻动胰腺后关腹。术后每只大鼠给予皮下注射生理盐水2.0 ml以补充术中丢失液体。术后1、4、8 h处死大鼠，留取血液、胰腺组织及肺组织。

2．血淀粉酶测定：采用全自动生化分析仪检测。

3．肺组织病理学检查：肺组织经4%多聚甲醛溶液固定、石蜡包埋、4 μm切片，HE染色，光镜下观察肺组织的病理改变。

4．肺组织 IL-22含量测定：取新鲜肺组织，制备组织匀浆，离心取上清，蛋白定量后，应用ELISA试剂盒(R&D公司)测定IL-22含量，按说明书操作。……