李燕 姚萍 邓一芸 廖如奕 席利力 吴浩

研究发现，重症急性胰腺炎(SAP)常并发肠黏膜屏障功能障碍(IBD)[1-2]，出现肠道细菌易位，继发肠源性感染。感染相关并发症导致的病死人数占SAP患者病死总人数的80%[3]。中药大黄作为一种溢清泻下的药物已应用于临床，但其详细机制不清。本研究旨在观察大黄对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肠黏膜屏障及肠道菌群的保护作用。

一、材料与方法

1．实验动物及分组：健康雄性SD大鼠42只购自新疆医科大学动物中心，清洁级，体质量220～280 g。适应性喂养1周后按数字表法随机分为对照组(10只)、ANP组(14只)和大黄治疗组(18只)。采用胰胆管逆行注入 5%牛磺胆酸钠(美国Sigma公司)1 ml/kg体质量的方法制备ANP模型。大黄治疗组大鼠制模后即给予10%熟大黄煎液(我院药剂科配制)灌胃，2 ml/只，每8 h重复给药一次，共3次。对照组大鼠在开腹后仅轻轻翻动十二指肠后关腹。术后24 h常规腹腔麻醉，腹正中开腹，分离肠管，于回盲部取肠系膜淋巴结2枚置入无菌离心管；腹主动脉采血4～5 ml，离心分离血清；于胰头处取胰腺组织、肝右叶取肝脏组织各一份置入无菌离心管，另取胰头处胰腺组织、回盲部回肠组织各一份置10%甲醛溶液中固定；取回盲部粪便标本，液氮速冻，置-70℃冰箱保存。

2．检测指标：(1)腹水量：开腹后用已称重的灭菌干棉球吸尽腹腔腹水，再次称重，两次重量差即为腹水量。(2)细菌易位率：在超净工作台中用匀浆研磨器充分研磨肠系膜淋巴结、胰腺、肝脏组织，然后分别接种于需氧及厌氧培养基，常规行需氧及厌氧培养，24～48 h观察需氧菌生长情况，3～5 d观察厌氧菌生长情况。……