安增梅 董兴刚 过源 周佳亮 秦涛

糖尿病是一种常见病及多发病。糖尿病的主要并发症之一是糖尿病肾病，也是糖尿病患者病死的主要原因[1]。糖尿病肾病的发病及其进展与氧化应激密切相关[2]，但是与胰腺损伤的关系研究较少。因此，本研究检测糖尿病大鼠胰腺的氧化应激反应，探讨糖尿病大鼠胰腺的损伤机制。

一、材料与方法

1．动物分组和模型制作：雄性SD清洁级健康大鼠20只，8周龄左右，体质量(200±30)g，由复旦大学医学院动物学部提供。饲养环境为每笼5只，温度(22±2)℃，相对湿度(55±2)%。适应性喂养1周后，将20只大鼠按数字表法随机分为糖尿病组和对照组，各10只。采用链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)一次性腹腔注射60 mg/kg体质量的方法制备糖尿病模型。STZ购自美国Sigma公司，临用前用新配制的0.1 mmol/L的枸橼酸缓冲液(pH4.5)配成1%浓度的STZ溶液。对照组腹腔注射等容积的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。72 h后，糖尿病组大鼠经尾静脉采血，用血糖仪及血糖试纸测定大鼠血糖，以其血糖≥16.7 mmol/L，大鼠出现明显的多食、多饮、多尿症状确认模型成功。在12周末用摘眼球取血采样后断颈椎方法处死大鼠，取部分胰腺、肾脏组织置10%甲醛液固定，部分胰腺组织经液氮速冻后置-80℃冰箱保存。

2．尿蛋白、血糖、血胱抑素C(CytC)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平检测：采用双缩脲法测定24 h尿蛋白定量，采用罗式血糖测定仪测定血糖，免疫比浊法检测血清CytC水平，采用淀粉酶测定试剂盒(速率法)测定淀粉酶活性，采用比色法检测大鼠血清SOD水平，采用ELISA法检测血清MDA水平。……