Mesothelin抗体修饰的纳米探针对人胰腺癌细胞BxPC3的体外靶向研究
2014-08-04卢明智乐文俊崔少斌孙兵妹陈炳地邵成伟
卢明智 乐文俊 崔少斌 孙兵妹 陈炳地 邵成伟
间皮素(Mesothelin)在正常人体的胸膜、心包和腹膜上的间皮细胞表达。近年来的研究发现,绝大多数胰腺导管腺癌表达Mesothelin蛋白[1],而正常胰腺组织及包括慢性胰腺炎在内的其他胰腺原发性疾病均无 Mesothelin表达[2-3],提示Mesothelin有望成为攻克胰腺癌的分子标靶。本研究构建一种负载Mesothelin抗体的复合纳米探针,并通过体外实验评估该探针对人胰腺癌细胞BxPC3的靶向治疗效果。
材料和方法
一、荧光纳米Fe3O4@SiO2探针的合成
根据文献[4-5]报道的方法合成荧光纳米Fe3O4@SiO2探针。在氩气保护下,往回流加热反应装置中加入乙酰丙酮铁和三甘醇,缓慢加热至沸腾,回流反应8 h。自然冷却至室温,磁分离洗涤数次后即得到稳定的Fe3O4溶液。在室温机械搅拌下,向150 ml的锥形瓶中加入一定量的Fe3O4溶液、去离子水、无水乙醇和正硅酸乙酯(TEOS),然后用氨水调节至pH值为9左右,继续反应12 h,然后磁性分离,用去离子水洗涤6次以上即获得Fe3O4@SiO2磁核。再经3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTS)修饰后获得氨基化的Fe3O4@SiO2磁核。
根据文献[6-7]报道的方法合成荧光量子点。在氮气保护下,3 ml去离子水中加入0.10 g硼氢化钠(NaBH4)和0.127 g碲(Te)粉,80℃下搅拌反应30 min,制备碲氢化钠(NaHTe)溶液备用。氮气保护下,在100 ml去离子水中加入0.457 g氯化镉(CdCl2)和420 μl巯基丙酸,用1 mol/L NaOH调节pH值为11~12,剧烈搅拌30 min,然后迅速加入上述新制备的NaHTe溶液,混合溶液立即变为橘红色,然后置100℃下搅拌反应7 h,异丙醇沉淀,离心后,用2 ml二次水重悬沉淀即获得在紫外激发下发红色荧光的CdTe量子点。
根据文献[8-9]报道的方法合成荧光纳米Fe3O4@SiO2探针。……
