参麦注射液对急性胰腺炎大鼠的治疗作用及其机制研究
2014-08-04岑峰严强张国雷倪俊袁文斌魏云海
岑峰 严强 张国雷 倪俊 袁文斌 魏云海
急性胰腺炎(AP)早期存在微循环障碍,这些微循环的变化与胰腺病变的严重程度及血液中胰酶升高的水平呈正相关[1-2]。参麦注射液具有抑制内皮素-1的表达与释放、抑制血小板聚集、抑制血栓素合成、促进前列环素产生等作用,因此具有改善局部微循环,增加血管通透性及抗氧化等药理作用。本研究应用参麦注射液治疗急性水肿性胰腺炎(acute edematous pancreatitis, AEP)大鼠,观察AEP大鼠微循环及炎症反应的变化,探讨其相关机制,为临床应用参麦注射液提供实验依据。
材料与方法
一、实验动物及分组
健康成年雄性SD大鼠(由浙江省医学科学院提供)60只,日龄80~90 d,体质量(200±50)g。按完全随机法分为参麦治疗组(参麦组)和AEP组,每组30只。实验前禁食12 h,自由饮水,称重后采用雨蛙素50 μg·kg-1·h-1连续7次腹腔内注射、每次间隔1 h的方法建立大鼠AEP模型。造模后1 h给予5%水合氯醛0.35 g/kg体质量腹腔注射诱导麻醉,继以0.1 g·kg-1·h-1维持麻醉。参麦组从尾静脉内缓慢滴注参麦注射液(5 ml·kg-1·d-1)进行治疗;AEP组给予等容积生理盐水缓慢滴注。造模前1 d和造模后1 h及1、3、5、7 d眼内眦交替采血,每次2 ml。7 d时处死两组大鼠各15只,14 d处死剩余大鼠,留取胰腺组织样本备用。另选取正常大鼠3只,留取胰腺组织备用。
二、方法
1.血清淀粉酶、血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)测定:采用ELISA法检测血清淀粉酶、PAF、VEGF的含量,试剂盒购自上海劲马生物科技有限公司,按说明书操作。
2.胰腺组织NF-κB mRNA及蛋白表达检测:应用总RNA快速提取试剂盒(Generay公司)抽提胰腺组织总RNA。采用实时RT-PCR方法检测NF-κB mRNA表达量。……
