陈常莲 吴香杰 布和巴特尔 白金亮

(1. 内蒙古民族大学附属医院，内蒙古 通辽 028000;2. 内蒙古民族大学蒙医药学院，内蒙古 通辽 028000)

悬钩子木为蔷薇科(Rosaceae)植物库页悬钩子Rubus sachalinensis Leveille 的干燥茎枝;蒙药名“博格日乐吉根”［1］，汉语名为珍珠干或悬钩子木［1、2］。蒙医药文献记载，味甘、苦，化味甘，治风热病、巴达干病、浮肿，治肺病特效，也治热性时疫。《中华人民共和国卫生部药品标准·蒙药分册》记载，悬钩子木具有解表、调元、止咳的功效;用于未熟热，瘟疫，讧热，感冒，肺热咳嗽，气喘，赫依热［1、3］。依据蒙药功效，本课题组经药理实验证实，该药对呼吸系统疾病有较好的治疗作用。据文献，该药的水煎剂具有良好的镇咳作用［4］。本实验用不同溶剂提取，以期寻找悬钩子木止咳的“有效部位”，为进而研究镇咳祛谈作用的物质基础提供药效学依据。

1 材 料

1.1 动物: ICR 种小鼠，体重为18 ～22g，雌雄各半。购于长春市亿斯实验动物技术有限公司提供。

1.2 药物: 蒙药材悬钩子木(批号: 20121015)，内蒙古民族大学附属医院;酚红(批号: 20091107)，沈阳市试剂三厂;氨水、乙醇均为分析纯。

1.3 仪器: HW-600 型三用恒温水浴锅，江苏金坛市荣华仪器生产有限公司;DHG-9141N 型恒温干燥箱，上海宝山精工电子仪器厂;酒精计，沧州市西北庄红旗仪表厂;98 -1-B 型电子调温电热套，天津市泰斯特仪器有限公司;EYELA 旋转蒸发仪，上海爱郎仪器有限公司;FAX15 -4N电子天平，上海民桥精密科学仪器有限公司;YLS -8A 多功能修咳引喘仪，准北正华生物仪器设备有限公司;TG16-ws 台式高速离心机，长沙湘仪离心机仪器有限公司;TC新世纪紫外可见分光光度计，北京普斯通用仪器有限公司;CSJ120 型粗碎机，丹东永德药化机械制造有限公司。

2 方法与结果［5、6、7］

2.1 药物提取: 取药材80g，每次加10 倍量蒸馏水回流提取2 次，每次提取2h，得到水提取液Ⅰ，把水提液Ⅰ浓缩得到浸膏15.0957g;另取药材80g，加10 倍量95%乙醇回流提取1 次，再用10 倍量75%乙醇回流提取2 次，每次提取的时间2h，将两次的提取液合并，得到乙醇提液，浓缩得到浸膏12 g;乙醇提取的药渣再加10 倍水量的回流提取2次，每次提取2h，得到水Ⅱ提取液，浓缩得到浸膏1.68g;把水Ⅱ提取浸膏和乙醇提取浸膏1: 1 合并，共得到四组浸膏。将得到的4 种浸膏用蒸馏水配制等生药量(8.56g·kg-1)的药液，备用。

2.2 小鼠氨水引咳实验: 体重为18 ～22 小鼠50 只，雌雄各半。随机分为5 组，每组10 只，分别为正常对照组、乙醇组、水Ⅰ组、水Ⅱ组、乙醇+水Ⅱ组等5 组，各组按生药量高剂量(8.56g·kg-1)灌胃给药7d，正常对照组灌胃给同剂量的生理盐水。末次给药半个小时后将小鼠置于多功能诱咳引喘仪内，以恒压将20%的氨水喷雾10s，观察记录各组小鼠引咳潜伏期以及小鼠2min 内咳嗽(以腹肌强烈收缩，同时张大嘴为准)的次数。结果表明: 与正常组比较水Ⅰ组，乙醇组，乙醇+水Ⅱ组的咳嗽次数减少(P＜0.05，P＜0.01)，水Ⅱ组的咳嗽次数无没有明显变化(P＞0.05);与水Ⅰ组比较乙醇组和乙醇+水Ⅱ组的咳嗽次多数(P＜0.01，P＜0.05)，说明水Ⅰ组、乙醇组和乙醇+水Ⅱ组的镇咳效果好。与正常组比较，水Ⅰ组、乙醇+水Ⅱ组的咳嗽潜伏期延长(P＜0.05)，说明以上两组有延长潜伏期的作用。

表1 悬钩子木对小鼠氨水引咳次数与潜伏期的影响(±s)

2.3 小鼠气管酚红实验: 体重为18 ～22 小鼠50 只，雌雄各半。随机分为5 组，每组10 只，分别为正常对照组、水Ⅰ组、乙醇组、水Ⅱ组、乙醇+水Ⅱ组等5 组，各组按生药量高剂量(8.56g·kg-1)灌胃给药7d，正常对照组灌胃给同剂量的生理盐水。末次给药30min 后腹腔注射2%酚红生理盐水溶液(0.1mL·10g-1)，25min 后脱臼处死，将小鼠仰位固定于手术板上剪开颈正中皮肤，分别剪下自甲状软骨至气管分支处等长的一段气管，放入3mL 生理盐水的离心管中，加入5%碳酸氢钠溶液0.1mL，离心(4000/min ，5min )取上清液。用分光光度计波长于546 nm 处测OD 值。结果表明，与正常组比较水Ⅰ组和乙醇组的吸光度测定值明显升高(P＜0.05，P＜0.01)，说明以上两个组有祛痰作用。与水Ⅰ组比较水Ⅱ组和乙醇+水Ⅱ组的吸光度小(P＜0.05，P＜0.01)，与乙醇组比较水Ⅱ组和乙醇+水Ⅱ组的吸光度没明显变化(P＞0.05)证明水Ⅰ组的祛痰效果最好。

表2 悬钩子木不同提取物的祛痰作用的比较(±s)

3 讨 论

3.1 蒙药“汤剂”是把药材粉碎混匀的粗粉，成人每次用量3 ～5g，加水250mL 微火煮至剩余1/3 水量，倾取汤液内服。本实验对悬钩子木不同提取溶剂的研究结果显示，悬钩子木水提物的止咳作用最为明显，验证了传统水煎用法的合理性。

3.2 本实验进一步证实，悬钩子木各种提取法中水提取物的镇咳、祛痰的效果最好。本实验为寻找悬钩子木止咳、祛痰的“有效部位”及作用的物质基础提供药效学依据。

［1］中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准.蒙药分册〔S〕.1998，42 -43.

［2］内蒙古卫生厅.内蒙古蒙成药标准〔S〕.赤峰: 内蒙古科技出版社，1984: 252.

［3］罗布桑. 蒙药学〔M〕. 呼和浩特: 内蒙古人民出版社，2006: 205.

［4］吴香杰，布和巴特尔，扎苏娜. 蒙药材库页悬钩子和毛接骨木抗炎镇咳作用的药理学研究〔J〕.内蒙古民族大学学报(蒙医药学)，2012，(22)1: 28.

［5］王海青，石静丽，田军. 浙贝止咳颗粒镇咳祛痰及抗菌作用研究〔J〕.中国实验方剂学杂志，2011，(17)16: 207-210.

［6］侯仙明，张凯.肉桂镇咳祛痰及平喘作用的药效学研究〔J〕.时珍国医国药，2009，(20)4: 831 -832.

［7］陈奇.中药药理研究方法学［M］. 北京: 人民卫生出版社，2000: 238 -244.