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亚甲基蓝测定微量肝素钠的研究

2014-07-04亓培培

关键词:实验方法

亓培培

(淮北市环保局 环境检测站,安徽 淮北 235000)

肝素(Hep)为葡糖胺聚糖,是蛋白多糖的一种.在人体内由肥大细胞分泌而自然存在于血液中,在体内外均有延缓或阻止血液凝固的作用[1].作为经典的抗凝血药物,肝素在临床上的应用已达60年之久,目前仍是心血管和血栓病人的首选抗凝血药[2].

肝素是由葡萄糖胺磺酸、葡萄糖醛酸、艾杜糖醛酸组成的,具有不同链长的多糖链混合物.在水溶液中由于其酸性基团的离解而成为带多个负电荷的大阴离子.肝素的检测方法有多种,总的分属于生物方法[3]和化学方法两大类.生物方法是法定方法,因受生物个体的影响较大,不易掌握.化学方法有分光光度法[4-8]、HPLC法[9]、毛细管电泳法[10]、电化学传感器[11]等.其中分光光度法因具有操作简便、快速、仪器价廉、灵敏度较高的优点而得到广泛的应用.因此进一步研究灵敏度高、选择性好的新分光光度法有重要的意义.实验结果发现,在pH为1.4~5.8的缓冲溶液中肝素钠能与亚甲基蓝发生缔合,使溶液出现明显的褪色,溶液吸光度的减少与肝素钠浓度成正比,建立了测定肝素钠浓度的分光光度法.该方法稳定性好,而且反应的pH值范围宽.用于注射用肝素钠浓度的测定结果满意.

1 实验部分

1.1 试剂和仪器

TU-1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);pHs-3型酸度计(上海第二分析仪器厂).

肝素钠标准溶液:准确称取1.000 g肝素钠固体(中国医药集团上海化学试剂公司……

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