文慧，卢永昌

摘要：建立同时测定唐古特瑞香（Daphne tangutica）中瑞香素和芫花素的含量的HPLC方法。采用Agilent ZORBAX（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱；检测波长为360 nm；柱温为30 ℃。结果表明，瑞香素在0.115～0.920 μg内线性关系良好（R2=0.999 9），其平均回收率为99.19%，RSD=1.2%（n=9）。芫花素在0.011～0.088 μg内线性关系良好（R2=0.999 9），其平均回收率为100.25%，RSD=1.5%（n=9）。该方法样品处理简单、准确度高、分离效果好，适用于该药的成分测定。

关键词： 高效液相色谱；瑞香素；芫花素；唐古特瑞香（Daphne tangutica）

中图分类号：O657.32 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）07-1654-03

Determination of Daphnetin and Genkwanin in Daphne tangutica by HPLC Method

WEN Hui， LU Yong-chang

（College of Life Science and Chemistry， Qinghai University for Nationalities， Xining 810007， Qinghai， China）

Abstract： The high performance liquid chromatography（HPLC） was used to simultaneously determine daphnetin and genkwanin in Daphne tangutica. The samples were separated on Agilent ZORBAX（4.6 mm×250 mm，5 μm） column. Detection wavelength was 360 nm and column temperature was 30 ℃. The results showed that the linear range of daphnetin was good in 0.115～0.920 μg（R2=0.999 9） with the average recovery of 99.19% and RSD of 1.2%（n=9）. The linear range of genkwanin was good in 0.011～0.088 μg（R2=0.999 9） with the average recovery of 100.25% and RSD of 1.5%（n=9）. This method was simple， accurate，and suitable for determining components and quantities of daphnetin and genkwanin in Daphne tangutica.

Key words： HPLC； daphnetin； genkwanin； Daphne tangutica

唐古特瑞香（Daphne tangutica）为瑞香科植物的干燥根及茎[1]，主要分布在青海果洛、玉树、黄南、海北等藏族自治州，生长在海拔2 700～3 100 m的林缘及灌丛中[2]，系传统藏药省相那玛。常用于治疗风湿痹痛、跌打损伤、风湿及类风湿性关节炎等疾病[3]。其主要化学成分为棕榈酸、月桂酸、 β-谷甾醇、7-甲氧基-8-羟基香豆素、瑞香素、芫花素、羟基芫花素、对羟基苯甲酸等[4，5]。

对于唐古特瑞香中含量分析仅见瑞香素的报道[5]，芫花素尚未见报道，本研究采用HPLC梯度洗脱法同时检测唐古特瑞香中的瑞香素和芫花素的含量。试验结果证明，该方法可操作性强、检测灵敏度高、结果准确可靠、重现性好，能有效地控制药品质量。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

Agilent 1200 型高效液相色谱仪（配备自动进样器、在线脱气机、四元梯度泵、柱温箱、DAD检测器、Agilent 1200色谱工作站）；KQ-300B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；瑞香素对照品（成都曼思特生物科技有限公司，批号MUST-12071104，纯度≥98%），芫花素对照品（成都曼思特生物科技有限公司，批号MUST-12073001，纯度≥98%），甲醇为色谱纯试剂，其他试剂均为分析纯，水为去离子水。……