赵文娟，徐升运（等）

摘要：研究了一株产纺织用中性蛋白酶MYS11菌株的培养基组成。结果表明，该菌株的发酵最适条件为碳源3%玉米粉、氮源1%大豆蛋白粉、添加0.2%KH2PO4。通过正交试验优化了发酵条件，即培养基起始pH 6.8、接种量6%、发酵时间54 h、发酵温度36 ℃。在最适条件下，MYS11菌株产酶活力达到1 884 U/mL，明显高于优化前水平。

关键词：纺织；中性蛋白酶；菌株；发酵条件

中图分类号：Q814.1；TS136 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）07-1641-04

Optimizing the Fermentation Conditions of the MYS11 Strain Producing Neutral Protease for the Textiles

ZHAO Wen-juan1，XU Sheng-yun1，MA Qi2，REN Ping2，QIN Tao1

（1.Institute of Enzyme Engineering，Shaanxi Academy of Sciences， Xian 710600，China；

2.Shaanxi Engineering Center for Enzyme Technology， Xian 710600，China）

Abstract： The fermentation medium of a MYS11 strain producing neutral protease for the textiles were studied. The results showed that the optimal medium was consisted of the carbon source 3% corn powder， the nitrogen source 1% soyabean protein powder， and 0.2% KH2PO4. The fermentation conditions were optimized by the orthogonal experiment. The optimum culture were initial pH 6.8， inoculation volume 6%， the time 54 h and the temperature 36 ℃. Under the optimal conditions， the activity of neutral protease from MYS11 reached 1 884 U/mL， increased obviously than before the optimization.

Key words： textiles； neutral protease； strain； fermentation condition

中性蛋白酶是应用于工业化生产的蛋白酶制剂之一，广泛应用于食品、饲料、纺织、洗涤、皮革脱毛软化、畜禽血液蛋白质水解、果酒啤酒和饮料的澄清以及医学治疗等应用领域中[1-5]。在纺织行业中应用中性蛋白酶进行纺织品整理以及毛织物防毡缩处理，具有广泛的应用前景，已成为研究的热点[6，7]。但是中性蛋白酶的发酵单位一直很低，使用成本高，导致该蛋白酶在纺织上应用受到较大的影响，如何提高中性蛋白酶的发酵单位，成为酶制剂发酵中的难题，其中培养基的组成及发酵条件对中性蛋白酶的产生起着决定性的作用。因此，本研究对产纺织用中性蛋白酶的菌株MYS11的培养基及发酵条件进行优化研究，分析产酶变化，以提高菌株产酶能力。

1 材料与方法

1.1 菌种

MYS11是陕西省科学院酶工程研究所从土壤中分离得到的产纺织用中性蛋白酶菌株。

1.2 主要试剂和仪器

主要试剂：L-Tyrosine（酪氨酸）（Sigma公司）；干酪素（酪蛋白）（上海润捷化学试剂有限公司）；其他药品均为国产分析纯，水为去离子水。

仪器：UV-640型紫外分光光度计、恒温调速摇瓶柜、高速冷冻离心机、水浴锅等。……