补肾活血方对血管性认知障碍模型大鼠神经递质及其受体的影响1)
2014-05-28曾建伟黄露芬高丽萍
范 雯,曾建伟,黄露芬,高丽萍,蔡 晶
血管性认知障碍(vascular cognitive impairment,VCI)是各种可能影响脑功能的心脑血管疾病导致认知功能下降的综合征,其含义包括了血管性痴呆(VaD),有乙酰胆碱等神经递质的降低[1,2]。目前认为,VCI与兴奋性氨基酸(EAA)毒性、兴奋性氨基酸与抑制性氨基酸(IAA)失衡等有关[2,3]。本文从血管性认知障碍模型大鼠大脑海马组织内兴奋性氨基酸、抑制性氨基酸以及与学习记忆有关神经递质的含量及其受体表达的变化,探讨补肾活血方对血管性认知障碍模型大鼠神经递质及其受体的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物 Wistar大鼠3月龄的大鼠(福建中医药大学动物实验中心提供),体重(245±26)g,大鼠按体重随机分组,正常饲养,维持室温20 ℃~22 ℃,自由摄食与饮水。
1.2 药品及试剂 补肾活血方购自福建省第二人民医院中药房,由肉苁蓉、淫羊藿、制黄精、丹参煎煮而成,混悬液为0.371g成药/mL,相当于人常用剂量。阳性中成药银杏叶分散片由沈阳格林制药有限公司生产(国药准字Z20060440,每片0.5g),用蒸馏水配制,混悬液浓度为0.01g成药/mL,相当于人常用剂量。乙酰胆碱(ACh)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)抗体均由北京博奥森生物技术有限公司提供。兔超敏二步法免疫组化检测试剂、浓缩型DAB 试剂盒由北京中杉金桥生物技术有限公司提供。Gly、ACh、GABA、Glu、5-HT、DA 标准品(Sigma公司,美国),含3-巯基丙酸的邻苯二甲醛试剂(批号:5061-3335,Fluka公司),0.4N 硼酸缓冲液(批号:5061-3339,Fluka公司),乙腈(色谱纯,德国Merck公司),水为超纯水,其余试剂均为分析纯。
1.3 实验仪器 1200高效液相色谱仪,包括G1311A 四元泵,G1316A 柱温箱,G1329A 自动进样器,G1329A 荧光检测器和化学工作站(美国Agilent公司)。……
