高雅倩等

[摘要]目的：观察含有灰树花子实体及绿茶提取物眼霜的抗衰老效果。方法：采用无创性仪器检测以及图像分析的方法，对23例受试者持续6周外用眼霜的效果进行分析。无创性检测的主要功效参数为眼部细纹（鱼尾纹）和皮肤弹力。采用VISIA-CR图像分析的方法进行眼部肤色评价。结果：使用测试眼霜6周后，眼部鱼尾纹各参数较0周基准值相比均有不同程度降低，但结果无显著性差异（P>0.05）。左、右双眼皮肤弹力平均值较0周的0.66/0.64上升到6周的0.76/0.74，且差异有统计学意义（P<0.05）。眼部肤色的亮度和均匀度较0周均有明显改善，改善幅度分别为0.54%和5.63%，且差异有统计学意义（P<0.05）。结论：含灰树花子实体及绿茶提取物眼霜可以有效提高眼部皮肤亮度和均匀度，增强皮肤弹力，且具有较高安全性。

[关键词]灰树花子实体提取物；绿茶提取物；抗衰老

[中图分类号]R75 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2014）17-1404-04

Anti-aging effect of eye cream product containing grifola frondosa fruiting body and green tea extracts

GAO Ya-qian1，WANG Xi2，KIM Eunjoo3，LI Li2， YEON Jaeho1， AN Susun1

（1.Amore-pacific （Shanghai） R&I Center Co.， Ltd，Shanghai 201801，China；2.West China Hospital，Chengdu 610041，Sichuan，China；3. Amore-pacific R&D Center，Yongin-si 446-729， Korea）

Abstract： Objective To evaluate the anti-aging effect of emollient eye cream formulated with Grifola frondosa extract and green tea extract. Methods A randomized， blinded test was performed on 23 subjects for six-week. Fine wrinkles， skin elasticity and skin tone of eye area were evaluated as main reference parameters using several bioengineering instruments and image analysis method. Results After six-week application， positive change of eye fine wrinkles （the crows feet） was observed but not statistically notable （P>0.05）. Even though， skin elasticity and skin tone （brightness & evenness） were improved with significance （P<0.05）.No adverse effect was observed. Conclusion The emollient eye cream could effectively improve skin elasticity， skin color of eye area and may positively affect fine wrinkles after six-week application and it is demonstrated to be safe to use.

Key words：Grifola frondosa fruiting body； green tea；anti-aging

随着年龄的增长，环境污染的加剧，皮肤真皮层会变薄，真皮层中的胶原蛋白和弹性纤维结构网络也会开始退化，导致皮肤弹性丧失，出现皱纹。研究发现由于皮肤衰老受人种、地域、环境、生活习惯等多方面因素的影响，因此正确的皮肤护理可以最大程度地减少皮肤受损，延缓衰老[1]。随着自由基生物学的发展，能够有效清除自由基的抗氧化活性物质成为抗衰老研究的新热点[2]。作为植物来源的天然食物抗氧化剂的绿茶提取物也被广泛应用于化妆品领域[3-6]。近年来，越来越多的学者们把目光投向了食用、药用真菌。研究证明，食用菌的多糖类、酚类、对联三苯类、三萜类及子实体的粗提物都具有很好的抗氧化作用，其中就包括灰树花子实体提取物[7]。本研究旨在临床评价含有灰树花子实体提取物与绿茶提取物的护肤品对抗女性眼部早期衰老的功效和安全性。

1 资料和方法

1.1一般资料：选取23例成都地区健康女性。入选标准：年龄35～40岁，眼部皱纹轻到中度，自愿参与本次研究，能严格遵守研究方案的要求，并签署知情同意书，按要求使用产品并完成随访。排除标准：面部有急性炎症或其他皮肤疾病者；过敏体质；已知对研究应用产品或类似产品有过敏史者；妊娠、哺乳者；有慢性消耗性疾病者；当前或近3个月内参加过其他面部临床研究或接受过皮肤科医生治疗者；当前或近2个月内使用过任何抗炎药物或近1月内使用免疫抑制剂者。终止及退出标准：受试者发生了不良反应或特殊生理病理变化，不适宜继续参加本次研究；受试者依从性差；使用了研究方案规定的禁用药品，过多地接受紫外线照射及其他特殊原因自行要求退出者。

1.2试验方法

1.2.1测试产品及设计：测试眼霜由爱茉莉太平洋公司提供，含有灰树花子实体及绿茶提取物。要求所有受试者早晚各一次在眼部使用。研究开始前，产品用统一无标识包装进行盲法处理，排除主观意识干扰。本研究通过四川大学华西医院临床试验与生物医学伦理专委会审批。试验地点为四川大学华西医院化妆品安全性与功效性评价实验室。测试时间为2012年4月～2012年6月。

1.2.2 仪器测试和方法：受试者在使用前0周和使用3、6周时各随访1次，共计3次，要求受试者每次随访为日间同一时间。要求受试者清洗面部，并用无添加荧光剂纸巾吸干面部水分，在恒温恒湿（室温22℃±2℃，相对湿度45%±5%）环境下，静坐20min之后，由技术人员进行测定。

1.2.3 仪器测量指标

1.2.3.1 3D皮肤成像（Primospico，GFM公司，德国），测试结果用Sa、Sq、Smax、Sz4个参数反映眼部细纹的变化。Sa（Arithmetic Roughness）是一个垂直参数，代表测试面积范围内每个点的高度的算术平均值，描述的是垂直方向上的凹凸面。Sq（Quadratic Roughness）是单位测试面积中每个点的高度平方的平均值的平方根，若为多个单位测试面积的话，则为每个单位测试面积Sq的平均值。Smax（Maximum Stretching of the Roughness Profile）是指在全部测试面积内，最高波峰和最低波谷的高度差。Sz（Ten Point Height）为全部测试面积内，5个最高波峰和5个最低波谷的绝对值的算术平均值。各参数值越小，则皱纹状态越好，改善程度越明显。

1.2.3.2 皮肤弹力（Cutometer，2mm探头，MPA580，Courage + Khazaka公司，德国），用参数R2值来评估。R2值是无负压力时的弹力和有负压力时的最大拉伸值之比。R2值越接近1，说明皮肤弹性越好。

1.2.3.3 面部成像（VISIA-CR，Canfield公司，美国），利用图像处理软件对图像进行分析的方法来评估眼部肤色的亮度和均匀度。皮肤亮度参数通过强度来体现。如果强度增加，则皮肤亮度在增加。皮肤颜色的均匀度通过强度差来分析。如果强度差降低，则肤色均匀度增加。

1.2.4 受试者主观评价：受试者分别在第3周和第6周随访时完成自我评价问卷，根据个人主观感受对测试眼霜的功效进行评价。

1.2.5 不良反应评价：在试验的0、3、6周对受试者进行不良反应评价。询问受试者是否出现眼部干燥、脱屑、瘙痒等症状，并观察是否有皮疹、红肿及脱屑。不良反应的评估标准为0～3分制4级评分标准：3=严重，2=中度，1=轻微，0=无。

1.2.6 统计学方法：利用Excel，R语言和SPSS软件进行数据处理和统计分析。配对t检验被用于比较各参数基准值和每个时间点的数值（3周和6周），显著性水平为95%的置信区间（P<0.05）。

2 结果与分析

2.1 受试者统计资料结果：选择符合入组条件的女性受试者23例，平均年龄（37.4±1.9）岁，最终由此23例完成本次研究。

2.2 眼部细纹（鱼尾纹）结果：使用测试眼霜后，受试者眼部细纹（鱼尾纹）以及眼角下垂程度较基准线（0周）有一定程度的改善。虽然显著性分析结果但并无统计学意义（P>0.05），但从Primos图像上还是可以观察到明显的眼部细纹状况改善（见表1，如图1）。

2.3 眼部皮肤弹力分析：使用测试眼霜后，双眼鱼尾纹部位皮肤弹性较基准线都有明显提高，且左眼尾皮肤弹性改善要高于右眼尾。采用配对t检验进行显著性分析，具有统计学意义（P<0.05），如图2。

2.4 眼部肤色分析（黑眼圈部位）：使用测试眼霜6周后，眼部皮肤的亮度增幅为0.53%，均匀度降幅为5.63%。经显著性分析验证，具有统计学差异（P<0.05），见表2。

2.5 自我评价问卷结果：23例受试者根据自己亲身使用感受对测试眼霜做出主观评价，问卷在3周和6周随访时进行。

使用测试眼霜3周后，82%的受试者表示对测试眼霜的保湿度和易吸收效果感到满意，91%受试者明显感知到眼部皮肤比以前变得更滋润，同时，86%的受试者对测试眼霜的整体功效表示满意。使用测试眼霜6周后，82%的受试者表示对测试眼霜能够改善眼部细纹的效果感到满意，91%受试者感知到眼部皮肤变得更滋润，且86%的受试者对测试眼霜的整体功效表示满意。

2.6 安全性评价：整个研究过程中未有与测试眼霜相关的不良反应事件。

3 讨论

化妆品抗衰老功效是研发的永久热点。针对皮肤衰老的不同机理，可以通过化妆品来延缓衰老过程的方式不外乎3种。一般通过长期修复细胞外基质使肌肤结实，或通过添加抗氧化剂，减少皮肤的自由基损伤，来调节皮肤免疫和提高自我保护作用，或者通过加入植物油来改善皮肤老化，加速蛋白分泌来达到对抗皮肤衰老的目的，其中天然活性氧化剂还能有效防止紫外线及其他有害射线引起的色素沉淀，从而改善肌肤光泽。基于以上的考虑，天然的灰树花与绿茶提取物都不失为极有潜力的抗衰老活性添加物。

灰树花，学名为Grifola frondosa （Fr.）S.F.Gray，又名舞茸，栗蘑，贝叶多孔菌，云蕈等，分类学上属担子菌纲（Hymenomycetes），非褶菌目（Aphyllophorales），多孔菌科（Polyporaceae），树花属（Grifola），是一种药、食兼用的珍稀食用菌。自20世纪80年代起，国内外学者就对灰树花进行了大量研究，从灰树花子实体和菌丝体中提取了几十种活性多糖。灰树花多糖作为优质生物反应调节剂，具有增强免疫功能，抑制肿瘤，抗HIV病毒，稳定血压，降低血糖等功效[7-8]。除多糖外，灰树花提取物还含有大量铁、铜、硒、铬、锌、维生素C、维生素E等人体代谢必需微量元素，具有抗衰老、美白、增强记忆力和灵敏度等功效。随着对灰树花提取物优良抗氧化作用机理和应用研究的深入[7-10]，灰树花提取物作为化妆品活性原料被列入美国化妆品盥洗用品及香水协会2008年出版的《国际化妆品原料字典和手册（第十二版）》中，随后也被收录入国家食品药品监督管理局发布的《国际化妆品原料标准中文名称目录（2010年版）》中。同样作为化妆品活性原料的绿茶提取物，也被国内外多篇研究报道其活性成分EGCG（左旋表没食子儿茶素没食子酸酯）是茶多酚中最有效的化学光防护剂，可以通过抗氧化来有效改善光老化引发的真皮弹性纤维病变，改善皮肤弹性，从而延缓、预防光老化[11-12]，且绿茶提取物的光防护作用在人体试验中也已经得到证实，因此，外用绿茶提取物抗衰老是非常可行的抗衰老护理方法[13]。

本研究发现，在眼部使用含灰树花子实体及绿茶提取物眼霜6周后，眼部鱼尾纹有逐渐改善的趋势，且左眼比右眼更为明显，这是由于w0时左眼皱纹各参数值均明显低于右眼，右眼皱纹状态较左眼严重；同时使用眼霜前后的Primos图像也反映了皱纹的变化，可见测试眼霜具有一定改善眼部细纹的效果。若要进一步明确灰树花子实体及绿茶提取物对眼部细纹的显著改善周期，还需要在6周基础上进一步延长测试周期进行对比研究。测试眼霜对于眼部肤色的参数3周没有明显变化，到6周时才有统计学意义，而皮肤弹性参数3周得到明显改善，到6周时改善更为显著。通过本研究表明，含有灰树花子实体及绿茶提取物可以有效改善眼部皮肤弹力，提亮和均匀眼部肤色（尤其黑眼圈部位），且具有一定程度地淡化眼部细纹的功效。利用抗氧化剂来进行抗皱护理时，各活性成分往往需要更长的起效时间才能看到明显的皱纹改善效果，因此，还需要更长时间的研究、观察。

综上所述，含有灰树花子实体及绿茶提取物的护肤眼霜对眼部皮肤早期老化所引起的皮肤弹性下降，肤色黯沉，细纹有显著改善作用，且具有较高的安全性。

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[收稿日期]2014-06-13 [修回日期]2014-07-15

编辑/何志斌