Adv-HIF-1αmu转染内皮祖细胞对CXCL12表达影响的研究
2014-04-21刘丹平张解元
赵 辉,刘丹平,齐 鑫,张解元,李 谌
辽宁医学院附属第一医院,辽宁锦州 121001
Adv-HIF-1αmu转染内皮祖细胞对CXCL12表达影响的研究
赵 辉,刘丹平,齐 鑫,张解元,李 谌
辽宁医学院附属第一医院,辽宁锦州 121001
目的研究转染低氧诱导因子1α突变型(hypoxia inducible factor 1αmu,HIF1αmu)后的外源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)中CXCL12的表达情况及对EPCs的影响。方法密度梯度离心结合差速贴壁法分离、培养EPCs并进行鉴定;以Adv-HIF-1αmu的最佳转染指数转染EPCs,获得含有目的基因处理的EPCs细胞,设为A组。B组为单纯转染Adv的EPCs。设未转染Adv-HIF-1αmu的EPCs为C组。Western Blot检测转染后的EPCs中HIF-1的表达,检测转染后的EPCs培养液上清液中的CXCL12浓度及其对外源性EPCs迁移的影响。结果密度梯度离心结合差速贴壁法获得的EPCs能够结合UEA-1和摄取ac-LDL,并具有成血管作用;转染Adv-HIF-1αmu的EPCs表达的HIF-1及CXCL12高于单纯转染Adv的EPCs及未转染Adv-HIF-1αmu的EPCs(P<0.05),且能诱导外源性EPCs的迁移。结论密度梯度离心结合差速贴壁法能够分离、培养符合特征的EPCs,转染Adv-HIF-1αmu的EPCs能够在常氧条件下高表达HIF-1及CXCL12,并诱导外源性EPCs的迁移。
内皮祖细胞;低氧诱导因子-1αmu;腺病毒;趋化因子CXCL12
内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是一类来源于骨髓,存在于外周血循环中,在生长因子的作用下可分化为内皮细胞(endothelial cells,ECs)的前体细胞[1-2]。低氧诱导因子1(hypoxia inducible factor1,HIF1)是一种广泛存在于哺乳动物和人体内的在低氧条件下表达的转录因子,可促进血管再生和微血管形成,提高组织和细胞在缺血环境下的生存能力[3-5]。而HIF-1α被证明可以上调局部的趋化因子CXCL12[3],通过CXCL12/ CXCR4生物学轴的作用促进含有其受体CXCR4的EPCs的趋化及归巢作用并增强改善缺血能力[6-7]。因此,若两者能在缺血局部共同发挥作用,可以更好地促进局部血管形成,改善缺血部位的血运,促进恢复。……
