瘦素减轻鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤
2014-04-21张金英宋翠红颜光涛
韩 铭,张金英,宋翠红,梁 辰,冯 杰,颜光涛
解放军总医院 基础所生化室,北京 100853
瘦素减轻鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤
韩 铭,张金英,宋翠红,梁 辰,冯 杰,颜光涛
解放军总医院 基础所生化室,北京 100853
目的探讨瘦素对鱼藤酮(rotenone)所诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的抑制作用。方法建立鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型,用瘦素进行干预,采用MTT比色法检测细胞存活率,锥虫蓝检测细胞死亡率,细胞形态学观察,并用Western blot法检测Bcl-2、Bax、p-GSK-3β(Ser9)和GSK-3β的表达水平,免疫荧光检测α-synuclein的表达水平。结果成功建立了鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型。在模型的基础上,瘦素干预后,细胞状态改善,细胞存活率提高约14%(P<0.05),细胞死亡率降低约17%(P<0.05),α-synuclein的浓度下降,Bcl-2和p-GSK-3β的表达显著提高。结论瘦素对鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有明显的抑制作用,可能是通过抑制GSK-3β的活性上调Bcl-2/Bax的比率和降低α-synuclein的表达而得以实现。
鱼藤酮;SH-SY5Y细胞;瘦素
SH-SY5Y细胞系是一种分化程度较低的肿瘤细胞,其细胞形态、生理和生化功能与正常神经细胞相似,并具有许多多巴胺能神经元的特点,可以合成多巴胺和去甲肾上腺素的能力和表达多巴胺转运蛋白。因此,SH-SY5Y细胞近年来被用来作为帕金森病研究的神经元模型[1]。
鱼藤酮是一种广泛使用且被认为“安全可靠”的农药,在蔬菜和鱼中会有少量残留,现发现鱼藤酮是帕金森病的一种危险因素,被认为是一种人类容易少量长期接触的环境毒素[2]。α-突触核蛋白(α-synuclein)是路易小体的重要组成部分,其过表达和错误折叠与帕金森病相关。……
