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普罗布考对高糖诱导的脂肪间充质干细胞损伤的保护作用

2014-03-21王哲刘晓玉张殿宝王喜良林学文王秋实

中国医科大学学报 2014年7期
关键词:氧化应激检测

王哲,刘晓玉,张殿宝,王喜良,林学文,王秋实

(1.中国医科大学盛京医院输血科,沈阳110004;2.中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室,干细胞与再生医学研究室,沈阳110001;3.沈阳202医院生殖中心,沈阳11003)

普罗布考对高糖诱导的脂肪间充质干细胞损伤的保护作用

王哲1,刘晓玉2,张殿宝2,王喜良3,林学文2,王秋实1

(1.中国医科大学盛京医院输血科,沈阳110004;2.中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室,干细胞与再生医学研究室,沈阳110001;3.沈阳202医院生殖中心,沈阳11003)

目的探讨普罗布考在保护人脂肪间充质干细胞(hADSCs)对抗高糖引起损伤中的作用及机制。方法原代培养人脂肪间充质干细胞hADSCs,应用免疫荧光对3~5代细胞表面抗原CD34、CD45、CD90、CD105进行表型鉴定。将hADSCs分为正常糖对照组(CON组)、高糖组(GLU组)、普罗布考+高糖组(PRO+GLU组)、抑制剂SB203580+高糖组(SB+GLU组)、普罗布考组(PRO组)、抑制剂SB203580组(SB组)。MTT法测定细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;DCFH⁃DA法检测细胞内活性氧水平。Western blot技术检测p⁃p38MAPK蛋白的表达水平。结果与CON组比较,GLU组hADSCs细胞增殖活性明显降低(P<0.05),凋亡细胞比例、ROS水平显著增加(P<0.05);与GLU组比较,PRO+GLU组和SB+GLU组hADSCs细胞细胞增殖活性都明显增加(P<0.05),凋亡细胞比例、ROS水平表达水平均显著降低(P<0.05);与CON组比较,GLU组p⁃p38MAPK表达水平明显上升,普罗布考预处理能明显抑制高糖诱导的p⁃p38MAPK表达水平上调。结论普罗布考能帮助hADSCs对抗高糖引起的损伤;p38MAPK通路参与高糖对hADSCs的损伤作用;普罗布考可通过抑制p38MAPK通路的激活保护hADSCs对抗高糖诱导的损伤。

普罗补考;脂肪间充质干细胞;p38MAPK;活性氧

糖尿病足部溃疡(diabetic foot ulcers,DFUs)在糖尿病患者中的发病率高达25%,这些患者中14%~ 24%最终需要接受截肢治疗[1,2]。……

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