赵正据，成 昊，向一鸣，吴 剑，罗菊英

血管内皮生长因子对尤文肉瘤的诊断及预后价值

赵正据，成 昊，向一鸣，吴 剑，罗菊英

目的 研究血清中的血管内皮生长因子(VEGF)在尤文肉瘤中的表达，为尤文肉瘤的诊断及预后的判断提供依据。方法 将本院骨科自2009年1月～2012年11月间18例组织病理学上诊断为尤文肉瘤而尚未进行过放、化疗的患者纳入本研究的病例组，分别收集所有患者化疗前和化疗后的血液样本，测量血清中VEGF的水平。此外，选择20名来本院体检的正常人作为健康对照组，亦检测其血清VEGF水平。 结果 18例尤文肉瘤患者平均血清VEGF水平为4547.78 pg/ml，健康对照组为175.8 pg/ml，前者比后者显著升高(P<0.01)。此外，在进行过新辅助化疗的患者，其化疗后的血清VEGF较化疗前显著下降(P<0.01)。结论 尤文肉瘤患者的血清VEGF水平显著增高，比较化疗前/后血清VEGF水平，可作为判断患者预后的标志。

内皮生长因子；尤文肉瘤；诊断；预后

尤文肉瘤作为骨髓间胚层支架细胞演变而来的未分化的网状细胞肉瘤，其发病率居于小儿原发恶性骨肿瘤的第2位，占原发性骨肿瘤的10%～15%。其恶性度高，发展快，病程短，早期即可广泛转移，预后不良，治疗及预后关键在于对局部原发病灶的控制及全身化疗效果的评估[1]。若能找到一种能够对监测尤文肉瘤病灶发展及化疗效果的指标，则对尤文肉瘤患者的治疗及预后具有极其重要的价值。肿瘤的生物学表明其生长及转移必然伴随血管的发生[2]，而血管内皮生长因子(VEGF)是刺激血管发生的最强血管因子，其作为主要的血管生长因子，能够诱导内皮细胞增殖并增加血管内皮细胞的通透性，从而激活血管内皮生长因子受体途径，触发促进内皮细胞生长、迁移的信号通路。而组织中VEGF的表达与肿瘤发生、发展高度相关，且被证明在治疗许多恶性肿瘤的过程中具有判断预后的价值[3]。由于ELISA法比组织免疫组化染色法具有定量测量的优势[4]，所以本研究选用ELISA法测量血清VEGF水平，旨在观察血清VEGF在尤文肉瘤中的表达，以研究其在尤文肉瘤的诊断及预后判断中的价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象 收集咸宁市中心医院骨科及湖北科技学院附属二院外科2009年1月～2012年11月间组织病理学上诊断为尤文肉瘤而尚未进行过放、化疗的患者，并与患者签订研究知情同意书。排除继发性肿瘤；之前进行过放、化疗及手术治疗；发生远处转移；<2岁或>75岁的患者。共纳入18例符合纳入标准的尤文肉瘤患者。另同期计算机随意抽取20名来本院健康体检的正常人作为健康对照组，年龄、性别等与病例组无显著性差异。

1.2 方法 18例患者根据标准化治疗方案制定新辅助化疗策略进行治疗，包括长春新碱、放线菌素D、环磷酰胺，并与依托泊苷和异环磷酰胺交替运用。分别于患者进行化疗前和化疗后，抽取患者的5 ml血液样本，使用人VEGF LISA试剂盒(Bender Medsystem,Austria)检测血清VEGF水平。通过MRI图像测量原发肿瘤的长、宽、高，运用公式 π/6×长×宽×高，计算出肿瘤的体积。

1.3 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件进行分析，采用Mann-Whitney U检验比较两组患者的血清VEGF水平，而治疗前/后的比较，运用Wilcoxon 配对秩和检验；相关性分析运用Pearson相关性检验。以α= 0.05为检验水准。

2 结果

18例患者中，男性10例，女性8例，平均12.44(7～18)岁，病灶发生部位以股骨最常见(10例)，其次为胫骨4例、肱骨2例及其他2例。MRI图像测量原发肿瘤的平均大小为213(31～1443)ml，其中<100 ml的3例；≥100 ml的15例。

病例组血清VEGF水平为(4547.78±2103.45)pg/ml，而健康对照组血清VEGF水平为(175.8±90.5)pg/ml，表明血清VEGF水平在尤文肉瘤的患者中出现显著性升高(P<0.01)。此外，病例组进行17个周期的化疗后，血清VEGF水平较之化疗前明显降低(2468.57 pg/ml vs 4547.78 pg/ml，P<0.01)。

整个研究中，随访时间为8～24个月，平均12个月。期间共有8例发生了肺部转移，其中1例患者死亡。肺转移患者总体生存率为87.5%，而非肺转移患者的总体生存率为100%。

3 讨论

很多研究发现，VEGF作为血管内皮特异性有丝分裂素及存活因子，能够增加血管的通透性，并能促进骨髓分化出更多的原始细胞，在新血管的生成中起到关键的调节作用，从而在肿瘤的发生、发展中发挥作用。临床一些研究已经证实，VEGF密切相关于血管的发生及许多肿瘤的预后[5]。之前的大多数研究都倾向于用免疫组化分析尤文肉瘤的活检组织，而本研究中，通过VEGF进行定量分析所得出的结论，与通过组织活检进行免疫组化分析及基因检测所得结论一致[6-7]。在相关VEGF与碱性成纤维细胞因子(bFGF)在小儿恶行肿瘤中作用的研究中[8]，检测病例组与健康对照组尿与血清中的VEGF及bFGF，发现血清VEGF与年龄、性别、肿瘤大小之间不存在相关性，但所有原始神经外胚层肿瘤患者与淋巴瘤患者血清中VEGF出现了显著性的增高，且在接受化疗后，血清中VEGF出现显著下降，bFGF未受到影响。然而此研究未进一步阐述血清中VEGF出现下降的原因。

从取样便捷性方面考虑，提取尿中VEGF显然比血清中VEGF要显得方便得多，但Pavlakovic等[8]的研究结果发现，升高的VEGF主要来源于肿瘤组织，且肿瘤患者与正常人的尿中VEGF的差异性不大。他们的研究也未发现血清VEGF水平与年龄、性别、肿瘤大小存在相关性。在本研究中，18例肿瘤患者与健康对照组相比，血清VEGF水平出现了显著的增高(P<0.01)。本研究还发现病例组化疗后血清VEGF水平出现显著下降(P<0.01)，因此认为，VEGF水平检测在化疗反应中可起到监测的作用，即对比化疗前/后血清VEGF水平差异，则可能作为判断预后的指标。而另外一些研究者也得到过类似的研究结果[9]。虽然本研究中有8例患者发生肺转移，但是未发现血清VEGF水平与肺转移及总体存活率之间存在相关性，与Rutkowski等[9]的报道类似。另外一些研究者则认为，VEGF在尤文肉瘤是个独立因素[10]。Zhou等[11]研究发现，骨髓细胞参与了尤文肉瘤中新生肿瘤血管的形成，且VEGF在这个过程中起到关键的作用，认为VEGF受体抗体可用于治疗尤文肉瘤。

由于本研究病例数太少，且仅发生1例患者死亡，最终无法完成Kaplan-Meier曲线。但是本次研究足以认定尤文肉瘤患者血清VEGF水平出现了显著的增高，而且比较化疗前/后血清VEGF水平可作为判断患者预后的标志，即血清中VEGF与尤文肉瘤的生物学行为密切相关。

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Value of vascular endothelial growth factor in the diagnosis and prognosis of Ewing's sarcoma

Zhao Zhengju1,Cheng Hao1,Xiang Yiming3,Wu Jian3,Luo Juying2

1.Department of Surgery,Clinical College;2.School of Nursing,Hubei University of Science and Technology;3.Department of Vertebral Column Joint,Central Hospital of Xianning City,Xianning,Hubei,437100,China

Objective To study the expression of vascular endothelial growth factor(VEGF)in Ewing's sarcoma,and to provide reference for its diagnosis and prognosis.Methods Eighteen patients,who were histopathologically diagnosed as Ewing's sarcoma and had not

chemotherapy or radiotherapy yet between January 2009 and November 2012,were selected as the case group.The blood samples of all the patients before and after the chemotherapy were collected,and the level of VEGF in their sera was detected.Furthermore,20 healthy people who received the health examination in the hospital were selected as control group.And the VEGF level in their sera was also detected.Results The average level of serum VEGF of 18 cases of Ewing's sarcoma was 4547.78 pg/ml,and that of the control group was 175.8 pg/ml.Compared with the latter one,the former significantly increased(P<0.01).Among the patients receiving the neoadjuvant chemotherapy,their levels of serum VEGF significantly decreased after the chemotherapy(P<0.01).Conclusion The serum VEGF level of the patients with Ewing's sarcoma significantly increases.The comparison between the VEGF level before and after the chemotherapy may be used as a marker for the prognosis of those patients.

vascular endothelial growth factor;Ewing's sarcoma;diagnosis;prognosis

湖北科技学院校级科研基金资助项目(KY09082)

437100 湖北 咸宁，湖北科技学院临床学院外科(赵正据，成 昊)，护理学院(罗菊英)；湖北省咸宁市中心医院脊柱关节外科(向一鸣，吴 剑)

罗菊英，电话：15872836020；E-mail：luojuying2012@163.com

R 738.1

A

1004-0188(2014)01-0012-03

10.3969/j.issn.1004-0188.2014.01.005

2013-07-16)