红莲外皮原花青素各级分的分析鉴定
2014-02-13彭芳刚吴卫国李绮丽宾冬梅陈晓华
彭芳刚,吴卫国,李绮丽,宾冬梅,陈晓华
(1.衡阳师范学院生命科学系,湖南 衡阳 421008;2.湖南农业大学食品科学技术学院,湖南 长沙 410128)
原花青素(proanthocyanidins,PC),是一类黄烷类单体及其聚合体的多酚类化合物,具有多种生物药理活性,如清除自由基[1]、抗氧化性[2]、防癌抗癌[3]、抗疲劳[4]等,且安全无毒性[5],在食品、药品、化妆品等领域有着广泛应用。植物体内的原花青素是一种多分散体系,聚合度从几到几十,不仅聚合度组成复杂,而且各组分间性质相近,因此除单体原花青素和部分低聚原花青素之外,很难分离纯化得到单一结构的纯多聚原花青素,只能得到一定分子质量范围的多聚原花青素混合物[6]。因此,一般只能以原花青素混合物为对象,结合化学反应和现代仪器研究化学组成和结构特征。根据红外光谱图中吸收峰谱带的位置、形状和强度,结合分子特征基团振动频率和结构的关系,可以确定分子中所含的基团或化学键,并辨别原花青素的两种单元结构——原花青定和原翠雀定[7-8]。反相高效液相色谱(reversed phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)及反相高效液相色谱-电喷雾电离-电喷雾电离-质谱联用(RP-HPLC-electrospray ionization-mass spectrometry,RP-HPLC-ESI-MS),可以较好地分离原花青素单体及低聚体的某些异构体,能够确定原花青素的单体和低聚原花青素组分[9-10]。
本实验对按聚合度分级分离得到的4 种红莲外皮原花青素级分,先进行平均聚合度测定,得出各级分的平均聚合度差异,再进行红外光谱扫描,根据各级分的红外光谱图,推断红莲外皮原花青素的主要结构单元,再进行RP-HPLC分析及RP-HPLC-ESI-MS分析,揭示不同级分的组成和化学结构特征。……
