程 超，薛 峰，李 伟，汪兴平,

（1.湖北民族学院林学园艺学院，湖北 恩施 445000；2.湖北民族学院生物科学与技术学院，湖北 恩施 445000；3.西北农林科技大学食品科学与工程学院，陕西 杨凌 712100）

葛仙米（Nostoc sphaeroidesKüting）是一种蓝藻门蓝藻纲念珠藻科念珠藻属的低等淡水藻类，仅在湖北省鹤峰县走马坪镇有大面积生长。葛仙米中富含7%～8%的藻胆蛋白（phycobiliprotein，PBP），主要为藻蓝蛋白和藻红蛋白，其中藻蓝蛋白含量是藻红蛋白的3.5 倍左右[1]。近几年人们对PBP抗氧化特性进行了研究[2-6]，如汪兴平等[7]研究发现葛仙米藻胆蛋白对超氧阴离子自由基（O2-•）的清除效果较好；藻蓝蛋白能减少血液和肝脏中过氧化物及丙二醛含量[8]。

葛仙米藻胆蛋白为胞内蛋白，其提取中会涉及很多处理，如破壁、浸提、干燥等工序，这些处理方式是否会影响PBP的抗氧化特性还有待研究。本实验利用邻苯三酚-鲁米诺化学发光法测定样品对的清除作用，初步评价处理方式是否会影响葛仙米藻胆蛋白对•的清除作用。

1 材料与方法

1.1 材料

葛仙米购于湖北省恩施市鹤峰县。

1.2 试剂

磷酸二氢钾、氢氧化钠、硫酸铵、乙酸、乙酸钠、三羟甲基氨基甲烷、盐酸、邻苯三酚、碳酸钠等（均为分析纯）；鲁米诺 美国Sigma公司；胃蛋白酶（酶活力为1∶3 000）、胰蛋白酶（酶活力为1∶250） 美国Amresco公司。

1.3 仪器与设备

高速冷冻离心机、Ф660pH/Temp/Mv meter 美国Beckman Coulter公司；ALPHA1-4真空冷冻干燥机 德国Marin Chris公司；BPCL型超微弱化学发光测量仪中国科学院生物物理研究所；Waters高效液相色谱仪（Waters 2998 Photodiode Array Detector，Waters e2695 Separations module） 美国沃特斯公司。

1.4 方法

1.4.1 样品的制备

反复冻融葛仙米藻胆蛋……