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天南星提取物的抑菌作用研究

2014-02-13罗廷顺代欣桃钱金栿

大理大学学报 2014年2期
关键词:天南星生药饮片

李 杨,罗廷顺,代欣桃,钱金栿*

(1.大理学院,云南大理 671003;2.大理州食品药品检验所,云南大理 671000)

天南星提取物的抑菌作用研究

李 杨1,罗廷顺2,代欣桃2,钱金栿1*

(1.大理学院,云南大理 671003;2.大理州食品药品检验所,云南大理 671000)

目的:研究天南星提取物的抑菌作用。方法:采用常量稀释法测定天南星生药和饮片的水提取物、醇提取物和乙酸乙酯提取物分别对金黄色葡萄球菌等11种供试菌的抑菌作用。结果:天南星生药和饮片的各提取物对11种供试菌均有抑菌作用,其中乙酸乙酯部位抑菌活性最强。结论:天南星生药和饮片的各提取物具有较好的抑菌作用,为其进一步开发利用奠定基础。

天南星提取物;抑菌作用;最低抑菌浓度

天南星为天南星科天南星属植物,以云南资源最为丰富。作为常用中药天南星具有燥湿化痰、祛风止痛、散结消肿等功效,用于咳嗽、眩晕、惊风等;外用治痈肿、蛇虫咬伤〔1〕。天南星具有抗肿瘤、抗心律失常、抗氧化、抗惊厥等多种药理活性〔2-7〕。中草药抗菌成分具有不易产生耐药性、广谱抗菌、毒副作用小等优点成为研究的热点。本文研究了天南星生药和饮片的水提取物、醇提取物和乙酸乙酯提取物对11种供试菌的体外抗菌作用,为从中草药中寻找抗菌药物及天南星的开发利用提供实验依据。

1 材料与仪器

1.1药材天南星采自云南大理苍山,经大理学院药学与化学学院夏从龙副教授鉴定为天南星科天南星属植物天南星(Arisaema erubescens(Wall.)Schott)。天南星饮片购自大理集盛大药房,经鉴定为天南星矾制品。

1.2供试菌株金黄色葡萄球菌(S.aureas),白色葡萄球菌(S.albus),大肠埃希菌(E.coli),痢疾志贺菌(S.dysenteriae),绿脓杆菌(P.aeruginosa),枯草芽胞杆菌(B.subtilis),伤寒杆菌(S.typhi),甲型副伤寒杆菌(S.paratyphiA),乙型副伤寒杆菌(S.paratyphiB),金黄色葡萄球菌ATCC25923,大肠埃希菌ATCC25922由大理学院基础医学院病原微生物教研室提供。实验中应用金黄色葡萄球菌ATCC25923和大肠埃希菌ATCC25922作为质控菌株。

1.3实验试剂及仪器MH琼脂(批号:090817)和MH肉汤(批号:090526)购自杭州天和微生物试剂有限公司;旋转蒸发仪(R-210,瑞士步祺);冷冻干燥机(FD-1C-80,北京博医康实验仪器有限公司);立式压力蒸汽灭菌器(YXQ-LS-50SII,上海博讯实业有限公司医疗设备厂);双人单面净化工作台(SW-CJ-2FD,苏州净化设备有限公司);隔水式恒温培养箱(上海一恒科技有限公司);电子天平(AL204-1C)。

2 实验方法

2.1提取物的制备取天南星块茎经干燥、粉碎,经蒸馏水回流提取,过滤,减压浓缩得天南星水提取物。天南星块茎粉末经95%乙醇回流提取,再经70%乙醇回流提取,过滤,减压浓缩得醇提取物。醇提取物加水溶解后用乙酸乙酯萃取得乙酸乙酯提取物。将上述提取物分别冷冻干燥后备用;天南星饮片处理方法同上〔8〕。

2.2细菌悬液的制备将供试菌株分别接种于MH琼脂平板上,置37℃恒温培养箱活化24 h。挑取琼脂平板上形态相同的菌落,用灭菌生理盐水调浓度至0.5麦氏单位,再用MH肉汤稀释至含菌量约107CFU∕mL。稀释后的菌液在15 min内接种〔9-10〕。

2.3各提取物最低抑菌浓度的测定取灭菌小试管15支进行编号。其中每组第13、14、15管分别标上“肉汤对照”、“菌液对照”、“溶剂对照”。每支试管分别加入MH肉汤2 mL。配制天南星各提取物浓度为50 mg∕mL。用吸管吸取药液2 mL放入第1管内,混匀后吸取2 mL放入第2管,同样混匀后吸出2 mL放入第3管,依此法逐管进行稀释至第12管。各管药物浓度分别为25、12.5、6.25、3.125、1.56、0.78、0.39、0.20、0.10、0.05、0.025、0.0125 mg∕mL,除“肉汤对照”管外其余各管均加入菌液0.1 mL,放入37℃恒温培养箱中培养24 h,取出,观察生长情况。在对照管符合要求的情况下,以肉眼未见细菌生长的最低药物浓度为天南星对细菌的最低抑菌浓度(Mini⁃mal inhibitory concentration,MIC)〔9-11〕。

3 实验结果

天南星生药及饮片的醇提取物部分、乙酸乙酯提取物部分、水提取物部分均有抑菌活性,抑菌活性为乙酸乙酯提取物>醇提取物≥水提取物。天南星饮片提取物较天南星生药提取物MIC有所降低,提示天南星饮片抑菌活性较强。见表1。

表1 天南星生药及饮片的各提取物对11种供试菌的MIC

4 讨论

本研究表明,天南星生药和饮片的各提取物具有较好的抑菌作用,天南星饮片较天南星生药抑菌作用强,其原因可能是饮片为矾制品,明矾〔12〕入药后有解毒杀虫、燥湿止痒、止血止泻、清热消痰的功效。明矾是否与天南星生药中含有的抑菌成分产生协同作用有待进一步研究。

中国是抗生素滥用严重的国家之一,随着抗生素的滥用,细菌的耐药性越来越强。植物以及中药抗菌药以其不易产生耐药性、广谱抗菌、毒副作用小等优点成为研究开发的热点〔13-14〕。本实验研究了天南星提取物的抑菌活性,为其抑菌成分的进一步分离及新药的开发奠定基础。

〔1〕国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部〔S〕.北京:化学工业出版社,2010:53-54.

〔2〕杨国平,钱金栿.天南星研究概述〔J〕.中国民族民间医药,2009,18(3):19-21.

〔3〕杜潇.天南星药理作用和临床应用研究概况〔J〕.医学信息:中旬刊,2011,24(7):3408.

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〔8〕李杨,陆倩,钱金栿.天南星提取物的抗炎作用及机制研究〔J〕.大理学院学报,2013,12(9):14-16.

〔9〕陈奇,卞如濂,陈修.中药药理研究方法学〔M〕.2版.北京:人民卫生出版社,2006:274-277.

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〔11〕洪小凤,王涛,施贵荣,等.隔山消不同极性提取物抑菌作用实验研究〔J〕.中成药,2011,33(6):146-148.

〔12〕许华欣.明矾入煎剂、丸剂内服的探讨〔J〕.陕西中医,2010,31(7):906-907.

〔13〕曾化松,王艳琳.抗生素滥用的现状及应对策略〔J〕.中国卫生事业管理,2012,29(5):341-343.

〔14〕王培卿,张橡楠,刘瑜新,等.9种蓼科植物抗菌活性〔J〕.中国实验方剂学杂志,2013,19(17):109-112.

*通信作者:钱金栿,教授.

(责任编辑 李 杨)

Antibacterial Activity of the Extracts from Arisaema erubescens(Wall.)Schott

LI Yang1,LUO Tingshun2,DAI Xintao2,QIAN Jinfu1*
(1.Dali University,Dali,Yunnan 671003,China;2.Dali Institute for Food and Drug Control,Dali,Yunnan 671000,China)

Objective:To explore the antibacterial activity of the extracts from Arisaema erubescens(Wall.).Methods:Solution dilution method was applied to measure the antibacterial effects of aqueous extract,ethanol extract and ethyl acetate extract from Arisaema erubescens(Wall.)against 11 experimental bacteria include Staphylococcus aureus.Results:All extracts showed antibacterial activity on 11 experimental bacteria.Ethyl acetate extract exhibited best antibacterial activity in 3 extracts.Conclusion:All the extracts of Arisaema erubescens(Wall.)exhibited good antibacterial effect.The research provided a scientific basis for the developing and utilizingof Arisaemaerubescens(Wall.).

extracts in Arisaema erubescens;antibacterial activity;minimal inhibitory concentration(MIC)

R285

A

1672-2345(2014)02-0009-03

10.3969∕j.issn.1672-2345.2014.02.004

云南省教育厅研究生基金资助项目(2011J057)

2013-12-04

2013-12-17

李杨,助理编辑,主要从事药物分析及活性研究.

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